腎臓の発生分化におけるKruppel-like転写因子の役割の解明

阐明 Kruppel 样转录因子在肾脏发育和分化中的作用

基本信息

  • 批准号:
    14657252
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1)腎臓におけるKruppel-like factor(以下KLF)の発現。現在までKLFは我々の単離したKLF15を含めて16種まで報告がある。このうち、腎臓に高い発現が報告されているKLF8,9,12,15について、出生前2日から生後4週までの発現パターンを検討した。このことは、我々が注目する輸送体の多くが発現する髄質内層の発生が出生後に起こることから、その時期に一致して発現に変化のみられるKLFを検索するためである。発現レベルは、real time RT-PCR, western blot(KLF12の抗体は新規に作成した。)にて行った。この結果、KLF12,15が出生後約2週に発現しはじめることが判明した。この経過は、我々の単離したクロライドチャネルCLC-K1の発現パターンと類似していた。次に、KLF12について、腎臓内での発現部位をin situ hybridization法にて検討した。皮質においては、血管内皮,中膜細胞、間質の細胞の一部、髄質においては内層基部の細胞に高発現がみられた。今後さらに細胞の同定をすすめていく。2)KLF15ノックアウトマウスの作成我々の単離したKLF15の生体内での役割を探るため、KLF15ノックアウトマウス作成を試みた。コンディショナルノックアウト作成のため、lox-P配列間にATGコドンを含むエクソンをミドルアームとしてノックアウトベクターを作成し、ES細胞にトランスフェクトし組み替えES細胞クローンを20クローン以上を得た。これをblastcystにinjectionし、キメラマウスを今現在5匹(ほぼ全て90%以上キメラ)得る事に成功した。今後ノックアウトマウスを作成し、形質を検討する。
1) check the Kruppel-like factor (the following KLF) to see. There are now 16 KLF reports that are available in our remote KLF15. It was reported that you were suffering from KLF8,9,12,15, 2 days before birth, 4 days after birth, and 4 days after birth. In recent years, we have paid close attention to the delivery of medical materials, and we have paid close attention to the fact that after birth, people in the hospital have started to have sex after birth, and we have made consistent efforts to make sure that there is no need to pay attention to KLF after birth. The new specification of KLF12 antibody, real time RT-PCR, western blot is now available.) All right, all right. The results showed that about 2% of KLF12,15 was diagnosed after birth. We do not know if you have passed the computer and we are not allowed to do so. You can see that the error type is similar to that of CLC-K1. The second, the KLF12 and the inner parts of the body were detected by in situ hybridization method. The epidermis, the vascular endothelium, the media cell, the inner cell, the base of the inner cell, the height of the cell. In the future, we will make the same decision. 2) the KLF15 system is designed to be used in the KLF15 system, and the KLF15 device is used to make an attempt. In the first place, the system was completed, and the lox-P was assigned to the ATG unit. The ES cell was assigned to receive more than 20 percent of the data, while the ES cell size did not change. Today, 5 horses (over 90% of the total number of horses) have been awarded success in blastcyst injection. From now on, we will make a mistake and make a mistake in the future.

项目成果

期刊论文数量(14)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kobayashi K, Uchida S et al.: "Human CLC-KB Gene Promoter Drives the EGFP Expression in the Specific Distal Nephron Segments and Inner Ear"J. Am. Soc. Nephrol. 13. 1492-1498 (2002)
Kobayashi K、Uchida S 等人:“人类 CLC-KB 基因启动子驱动特定远端肾单位段和内耳中的 EGFP 表达”J。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
HIROFUMI MAEHARA: "Expression of CLC-KB gene promoter in the mouse cochlea"NeuroReport. 14. 1571-1573 (2003)
HIROFUMI MAEHARA:“CLC-KB 基因启动子在小鼠耳蜗中的表达”NeuroReport。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Liu W et al.: "Analysis of NaCl transport in the thin ascending limb of Henle's loop in CLC-K1 null mice"Am. J. Physiol.. 282. F451-F457 (2002)
Liu W 等人:“CLC-K1 缺失小鼠亨利氏袢薄升肢中 NaCl 转运的分析”Am。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yoshikawa M, Uchida S et al.: "CLC-3 Deficiency Leads to Phenotypes Similar to Human Neuronal Ceroid Lipofuscinosis"Genes Cells. 6. 597-600 (2002)
Yoshikawa M、Uchida S 等人:“CLC-3 缺陷导致与人类神经元蜡质脂褐质沉着症类似的表型”基因细胞。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Atsushi Hayama: "Molecular mechanisms of Bartter syndrome caused by mutations in the BSND gene."Histochem Cell Biol. 119. 485-493 (2003)
Atsushi Hayama:“BSND 基因突变引起 Bartter 综合征的分子机制。”《组织化学细胞生物学》。
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  • 发表时间:
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