BMP上流の転写因子Glisによる象牙芽細胞分化調節機構の解明

BMP上游转录因子Glis调控成牙本质细胞分化的机制阐明

• 批准号: 14657492
• 负责人: 中島 美砂子
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657492/
• 关键词: Gli transcription factors; Bone morphogenetic proteins; 象牙芽細胞; リアルタイムPCR; Dentin Sialoprotein; 歯髄組織幹細胞; 電気的遺伝子導入法; Gil transcription factors

歯髄細胞は歯髄組織内では未分化の状態にとどまり、辺縁部のみ高度に分化した象牙芽細胞が存在する。つまり、歯髄内には象牙芽細胞への分化を抑制する因子が存在する可能性がある。以前、歯髄にのみに発現するジンクフィンガー型転写調節因子GliH1のノックアウトマウスを作製したが表現型はみられなかった。今回、歯髄に強い発現のあるGli1,Gli3およびGliH1のトリプルノックアウトマウスを用いてin vivoにおいてGlisのBMP上流での象牙芽細胞分化調節機構の解明を進めた。Gli1-/-;GliH1-/-は胎生致死とはならず、生後1年以上生存し、表現型はみられなかった。Gli3-/-は胎生致死であるため、Gli1-/-;Gli3-/-;GliH1-/-の胎生15.5日目の歯胚の連続切片を作製し三次元的に観察したが、表現型は見られなかった。したがって、ウシ培養歯髄細胞に、Gli1、Gli3およびGliH1の遺伝子を導入して過剰発現させ、ルシフェラーゼアッセイを行ったところ、Gli3およびGliH1がGli1の転写活性を抑制していることが明らかとなった。また、歯髄細胞にGli1、Gli3、GliH1の遺伝子3種を過剰発現させると、象牙芽細胞の分化マーカーであるDentin SialoproteinのmRNAの発現がGli1単独に比べて減少した。また、Gli1遺伝子導入によりOsterixの発現の上昇がみられ、Gli3をGli1とともに導入するとOsterix発現が減少し、Cbfa1およびCbfa3発現は上昇がみられた。rhBMP2を培養歯髄細胞に作用させると、象牙芽細胞への分化に伴いOsterixの発現の上昇がみられた。よってGliメンバーはその相互作用によりOsterixやCbfa1,3の発現を調節することにより、象牙芽細胞への分化を制御していることが示唆された。

There is no differentiation in the tissue and there is a high degree of differentiation in the tissue and the presence of ivory bud cells in the tissue. There is a possibility that there is a possibility that there is an inhibitory factor in the differentiation of ivory buds. In the past, you can see that the factor GliH1 is in the form of a table. This time, it is important to see how to improve the differentiation of ivory germ cells in the system of ivory bud differentiation through the use of Gli1,Gli3, GliH1, Glis, Glis, and BMP. Gli1-/-;GliH1-/-, fetal death, fetal death, survival more than 1 year after birth, phenotype, fetal death. The linked sections of Gli3-/- fetal death and Gli1-/-;Gli3-/-;GliH1-/- viviparity for 15.5 days were used to make a three-dimensional observation of fetal death. You need to know if you want to know if you want to use GliH1, Gli1, Gli1, Gli3, and so on. You need to know how to do this. You need to know how to write. The cells of Gli1, Gli3 and GliH1 were divided into three groups, the cells of ivory germ were differentiated, the cells of ivory germ were differentiated, and the number of Gli1 was less than that of Gli1. In this case, you can see that there is a small amount of money in the Osterix, and that there is a small amount of money in the Osterix, and that there is a small amount of money in the Osterix, so that you can see a lot of money in the Osterix, and then you can see that there is less in the Cbfa3. RhBMP2 plays an important role in the differentiation of ivory buds and the differentiation of ivory buds, together with the presence of Osterix. The interaction between Gli and Cbfa1,3 shows that the cells of ivory buds differentiate and control the differentiation of ivory buds.

项目成果

Nakashima M., Tanese N., Ito M., Auerbach W., Bai C., Furukawa T., Toyono T., Akamine A., Joyner A.L.: "A novel gene, GilH1, with homology to the Gli zinc finger domain not required for mouse development"Mech. Dev.. 119. 21-34 (2002)

Nakashima M.、Tanese N.、Ito M.、Auerbach W.、Bai C.、Furukawa T.、Toyono T.、Akamine A.、Joyner A.L.：“一种新基因 GilH1，与 Gli 锌指结构域具有同源性

庵原耕一郎, 中島美砂子, 石河真幸, 中島昭彦, 赤峰昭文: "BMP2を用いた歯髄細胞導入治療法による象牙質再生"日本歯科保存学雑誌. 46・5. 654-665 (2003)

Koichiro Ihara、Misako Nakajima、Masayuki Ishikawa、Akihiko Nakajima、Akamine Akamine：“使用 BMP2 通过牙髓细胞导入疗法再生牙本质”日本保守牙科杂志 46・5（2003 年）。

Nakashima M., Tanese N., Ito M., Auerbach W., Bai C., Furukawa T., Toyono T., Akamine A., Joyner A.L: "A novel gene, GliH1, with homology to the Gli zinc finger domain not required for mouse development."Mech.Dev.. 119. 21-34 (2002)

Nakashima M.、Tanese N.、Ito M.、Auerbach W.、Bai C.、Furukawa T.、Toyono T.、Akamine A.、Joyner A.L：“一种新基因 GliH1，与 Gli 锌指结构域具有同源性