口腔癌の蛍光診断および光線力学治療の開発とその細胞生物学的検討

口腔癌荧光诊断、光动力治疗及其细胞生物学研究进展

• 批准号: 14657528
• 负责人: 長山 勝
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657528/
• 关键词: 口腔癌; 前癌病変; 光線力学療法; 蛍光診断; フォトフリン; 5-アミノレブリン酸; レーザー; プロトポルフィリンIX; アミノレブリン酸; オプティックファイバー; 青色ダイオードレーザー

5-アミノレプリン酸(5-ALA)は生体内で光感受性物質であるプロトポルフィリンIX (PPIX)に変換される生理活性物質で、近年光線力学療法(PDT)や蛍光診断において種々の領域で医療応用されている。本研究では臨床研究においてALA-PDTの有用性および安全性を検討するとともに、その治療効果増強を目的に、培養細胞を用いて新規ALA誘導体の光生物学的作用を検討した。まず臨床研究では徳島大学歯学部附属病院倫理委員会の承認下に、口腔前癌病変に対してALA-PDTとともに蛍光診断を行い、その有用性および安全性を検討した。5-ALA内服4時間後にエキシマダイレーザーを照射し、PDTの前後で病変部および正常粘膜部に青色レーザー光を照射して、PPIXの励起蛍光をスペクトロメーターで測定した。その結果、ALA投与直後よりPPIXのピークが出現し経時的に増強した。このシグナルは正常粘膜部よりも病変部で強く、正常粘膜部では、5-ALA投与6時間後をピークに徐々に減弱した。一方病変部ではPDT直後にPPIXのシグナルはほぼ消失した。以上のことから5-ALA内服投与と青色レーザーにより、PPIXの蛍光強度を指標として腫瘍と正常の識別が可能であることが示唆され、このPPIXの分析はALA-PDTにおける条件設定および効果判定に有益であると考えられた基礎実験では、5-ALAおよびALA-Hexに加えて6種類の新規ALA誘導体を用い、マウス角化細胞株における細胞内PPIXの蓄積を蛍光光度計を用いてその蛍光強度を測定、比較した。またPPIXの細胞内局在は蛍光顕微鏡により観察した。さらに増感薬剤で処理した細胞にレーザー光を照射し、MTT法によりその光毒性を比較検討した。その結果、新規ALA誘導体はALAと比較して、同濃度もしくは低濃度で細胞内PPIX蓄積を亢進し、さらに光毒性も増強した。一方今回用いた濃度では、これらの誘導体は、ALA-Hexにみられるような細包毒性は認めなかった。また単位時間内に細胞内に取り込まれる薬剤量は、ALAと比較して同程度から約16倍に増加した。以上より新規ALA誘導体は、in vitroにおいてALAよりも低濃度で光毒性を示す一方、細胞毒性は低いことから、ALA-PDTにおいて治療効果の増強、投与量の削減、副作用の軽減に有用である可能性が示唆された。

5-photosensitive acid (5-ALA) photosensitive substances in vivo, in vivo, IX (PPIX), photoluminescence (PPIX), physiologically active substances, and in recent years, optical ray mechanics (PDT) has been used to cut off all kinds of drugs in the field of medicine. The purpose of this study is to study the usefulness of ALA-PDT, the safety, the results, the purpose, and the effects of new ALA on photobiology. The staff of the affiliated Hospital of the Department of Deutsche University will recognize that oral precancerous disease, ALA-PDT, light-cut, usefulness, safety, etc. After 4 hours of oral administration of 5-ALA, the normal mucous membrane was irradiated before and after 4 hours of oral administration of PDT. The normal mucous membrane was irradiated with cyan light, and PPIX was activated. The results of the test, the ALA investment and the back-to-back PPIX performance are significantly higher than those of the previous one. The normal mucous membrane showed severe disease, normal mucous membrane and 5-ALA. After 6 hours, the normal mucous membrane showed signs of weakness. One side of the disease was PDT, and then there was PPIX disease, and the disease disappeared. The above information is related to the internal administration of 5-ALA and cyan. The light intensity of PPIX indicates that it is possible to indicate that it is normal to detect normal light intensity, and that it is possible to indicate that it is possible to do so. The PPIX analysis indicates that the conditions of ALA-PDT health conditions are set to determine whether it is useful to determine whether it is beneficial to you. It is necessary to evaluate the health benefits of the new ALA health care system, such as the basic health care system, the 5-ALA health care system, the ALA-Hex system and the standard ALA system. The intracellular PPIX of keratinized cell line was measured and compared with the photometric meter of light intensity. The inside of the PPIX cell is looking at the light. The effects of light irradiation and MTT method on the phototoxicity were studied. The results showed that the results of new ALA test, ALA assay, intracellular PPIX accumulation and phototoxicity in low temperature group and low temperature group were significantly higher than those in control group. On the other hand, you can use it again and again. Now, you can use it again and again. You can use it again and again. If you want to use it, you can use it again and again. If you use it, you can use it again and again. You can use it again and again. It is about 16 times higher than that of ALA in the same amount of time. The above new ALA drugs, in vitro drugs, ALA drugs, low phototoxicity, cytotoxicity, low cytotoxicity, ALA-PDT, dose and dose, side effects, and the possibility of side effects indicate instigation.

项目成果

Nakanishi H: "In Vivo killing of porphyromonas gingivalis by toluidine blue-mediated photosensitization in an animal model"Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 47(3). 932-940 (2003)

Nakanishi H：“在动物模型中通过甲苯胺蓝介导的光敏作用体内杀死牙龈卟啉单胞菌”抗菌剂和化疗。