ミトコンドリアDNAのメチル化を指標とした癌の体液診断に関する研究

以线粒体DNA甲基化为指标的体液癌症诊断研究

• 批准号: 14657625
• 负责人: 前川 真人
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657625/
• 关键词: がん; ミトコンドリアDNA; メチル化; PCR-SSCP; 体液診断

癌における遺伝子異常として、遺伝子変異と欠失の他にメチル化が注目されている。確かに、癌化の過程で、また結果として、いくつかの遺伝子がメチル化されている。それらのいくつかは発癌の過程で重要であり、発癌メカニズムの一翼をなしていると考えられている。また、メチル化異常を癌診断の指標として考えることもできる。ただ、これらの研究は核ゲノムにおける変化であって、細胞内にはもう一つ、ミトコンドリアゲノムが存在する。果たして、ミトコンドリアという小器官の中で、DNAはメチル化を受けるのだろうか。もし、癌細胞でミトコンドリアDNAがメチル化を受けているとするならば、核DNAに比べて圧倒的に量が多いミトコンドリアDNAのメチル化を指標として、高感度に癌細胞の存在を診断することができるのではないかと考え、今回の検討を行った。ミトコンドリアDNA内でCpG配列が比較的多い領域を3カ所選択し、sodium bisulfite処理後のDNAをPCR-SSCPで解析した。15種類の癌細胞株、31種類の胃がん組織、10種類の大腸がん組織から抽出したDNAを試料として上記の方法で検討したところ、2種類の胃癌細胞株を除いた胃癌組織、全ての癌細胞株・大腸癌組織でミトコンドリアDNAのメチル化は認められなかった。メチル化が疑われた2種類の胃癌細胞においても軽い部分的なメチル化のみであった。ミトコンドリア内では、細胞内、核内のようにメチル化酵素が働く環境にないのではないかと考えられた。それは、内部環境もしくは環状DNAであることに起因しているかもしれない。結論として、ミトコンドリアDNAのメチル化を癌細胞の指標とすることは困難であることが判明した。

The cancer is caused by abnormal transmission, abnormal transmission, and abnormal transmission. The process of cancer, the result of cancer, the inheritance of cancer, and the transformation of cancer. The process of cancer development is very important. The index of abnormal cancer diagnosis was examined. The study of nuclear, biological, and intracellular mechanisms of nuclear, biological, and biological evolution As a result, the DNA of a small organ is transformed into a small organ. The amount of nuclear DNA in cancer cells is more than the amount of nuclear DNA in cells. The amount of nuclear DNA in The most common CpG sequences in DNA were analyzed by PCR-SSCP after sodium bisulfite treatment. 15 kinds of cancer cell lines, 31 kinds of stomach cancer tissues, 10 kinds of colon cancer tissues, 2 kinds of gastric cancer cell lines, gastric cancer tissues, all kinds of cancer cell lines and colon cancer tissues, all kinds of DNA samples There are two kinds of gastric cancer cells in the stomach. The enzyme in the cell, in the nucleus and in the environment The internal environment of the ring DNA Conclusion: It is difficult to identify cancer cells by DNA sequencing.