ヒト乳酸脱水素酵素サブユニット欠損症モデルとしてのAサブユニット欠損マウスの解析

A亚基缺陷小鼠作为人乳酸脱氢酶亚基缺陷模型的分析

基本信息

批准号：
05671920
负责人：
前川真人
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05671920/
关键词：
乳酸脱水素酵素欠損症遺伝子変異 PCR-SSCP 塩基配列決定

项目摘要

3種の乳酸脱水素酵素(LDH)Aサブユニット欠損マウスおよび正常対象のマウスから抽出したDNAを資料として、各エクソン領域をPCR-SSCP分析を行ったが、明かな異常は認められなかった。従って、エクソンおよびエクソン-イントロンジャンクションを全て塩基配列を決定した。3種のAサブユニット欠損マウスに点変異が認められたが、正常対照マウスにも認められ、単なる遺伝子多型と考えられた。従って、欠損の原因となりうるに有意な遺伝子異常は現時点で検出されていない。プロモーターの解析については、その途上であり未だ有効な結果は認めていない。一方では、ヒトのLDH-Aサブユニット欠損症の本邦第7家系目が福岡県で報告された。臨床的には今までに明らかとした筋症状や皮膚症状の発現が弱かった。遺伝子解析を施行したところ、未知の変異であることが判明し、塩基配列決定によりコドン171番におけるCCA(Arg)からTGA(Stop)へのナンセンス変異であると同定された。すなわち、点変異のホットスポットであるCpG dinucleotidesにおけるtransitionであった。基質結合ドメインの途中における未熟翻訳終了であるため、欠損症の原因遺伝子として妥当であると考えられた。以上の症例の遺伝子解析を含め、ヒトLDH-Aサブユニットにおける遺伝子異常は、総数18遺伝子座位を解析した結果、点変異が4種、欠落/重複変異が3種、スプライシング異常が0種と計7種の変異が見いだされた。3種のAサブユニット欠損マウスの解析によって、いずれもエクソン、エクソン-イントロンジャンクションに異常が認められないのはヒトにおける遺伝子異常とかなり態度を異にすると推定された。

使用从三种类型的乳酸脱氢酶（LDH）提取的DNA对每个外显子区域进行了PCR-SSCP分析，但缺乏亚基的小鼠和正常的靶小鼠，但没有观察到明显的异常。因此，对外显子和外显子内连接均进行了测序。在三种类型的A-亚基缺乏的小鼠中观察到了点突变，但在正常对照小鼠中也观察到了点突变，仅被认为是遗传多态性。因此，目前尚未检测到明显的遗传异常，这可能会导致缺乏。关于启动子的分析，尚无有效的结果。另一方面，福库卡县已经报道了人类LDH-A亚基缺乏症的第七家族。临床上，到目前为止，肌肉和皮肤症状的表现一直很弱。遗传分析表明，它是一个未知的突变，测序将其确定为从CCA（ARG）到CORDON 171的TGA（Stop）的胡说八道突变。也就是说，它是CPG二核苷酸中的过渡，这是点突变的热点。由于未成熟的翻译在底物结合域的中间完成，因此被认为是缺乏原因的合理基因。除了对上述病例的遗传分析外，发现人LDH-A亚基中遗传异常总数的分析还具有7个突变：四个突变，三个缺失/重叠突变和零剪接异常。对三只A-亚基缺陷小鼠的分析预测，外显子和外显子内连接处的异常与人类的遗传异常有显着差异。