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心筋細胞内各種加水分解酵素の病態生理学的意義の解析

心肌细胞中多种水解酶的病理生理意义分析

基本信息

批准号：
62480213
负责人：
豊岡照彦
金额：
$ 4.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

项目摘要

年度初の研究計画で述べた予想通り、組織培養下の細胞内Caイオンの動態の観察を開始した。用いた細胞は新生児ラット心筋、成熟ラット大動脈欠陥平滑筋および既成のセルラインであるA10由来であり、いずれも初年培養に成功し、かつ細胞内にCa^<2+>感受性の蛍光色素を負荷した状態で各種薬物に対する反応を詳細に観察する事ができた。以下に各細胞で得られた結果を簡単に報告する。心筋細胞は培養下の細胞に色素を投与しても活発な律動変化が認められ、明瞭なCa^<2+>動能も確認された。また多数の細胞が融合している状態では、その中のペースメーカー細胞と考えられる細胞から次ぎ次ぎに隣接する心筋細胞にCa^<2+>の変化が伝播して行く像が、観察されこれは、世界でも最初の報告と考えられる。但しこの2次元像を解折するために日本研究で開発した方法でも時間分解能が不十分な為、詳細な分布は未だ十分為されていない。一方大動脈とセルラインを用いた血管平滑筋細胞では薬物に対する反応が比較的緩徐なため、詳細な観察が可能であり、細胞外にCa^<2+>の存在する時、しない時、K^+による脱分極状態、血管作動薬の存在下で2次元画像を得る事に成功し、これらの成果はデータがまとまり次第、順次文献、学会発表を予定している。また心筋細胞内加水分解酵素の中のCa^<2+>活性化中性蛋白分解酵素(CANP)の生理的・病態生理的意義の解折を、まずヒト血小板で検討した結果、本酵素はその凝集過程にかかわる本質的な酵素である事が判明し、これは、昭和64年初の米国循環器学会誌に採択された。以上の如く、当初の目的は、ほぼ達成され、今後の遺伝子工学的手法の解析と組み合わせば、更なる発展が、期待される。

The initial research project of the year was described and the investigation of intracellular Ca ~(2 +) dynamics in tissue culture was initiated. The cells were cultured successfully in the early years, and the Ca^<2+> sensitivity and photochrome loading status of the cells were examined in detail. The results obtained for each cell are summarized below. The cardiac muscle cells were cultured in vitro, and the pigment was injected into the cells. Most of the cells are fused, and the cells in the middle are fused. The cells in the middle are fused. However, this two-dimensional image decomposition method has been developed in Japan. The time decomposition energy is not very large, and the detailed distribution is not very large. The vascular smooth muscle cells in one side of the artery are used in the opposite direction of the substance. The slow, detailed observation is possible, the extracellular Ca^<2+> is present, the K^+ is depolarized, the two-dimensional image is obtained in the presence of vascular action, the results are successful, the sequence of literature, and the society table are predetermined. The physiological and pathological significance of Ca^<2+>-activated neutral protease (CANP) in intracellular hydrolytic enzymes of cardiac muscle cells, the results of platelet test, the identification of essential enzymes in the coagulation process of this enzyme, and the publication of the American Society of Circulators in early 1964. For example, the original goal is to achieve, the future of the genetic engineering method analysis, combination, development, expectations