微量組織からの年齢推定に関する研究:DNA酸化障害の加齢変化による解析

微量组织年龄估计研究：基于年龄相关变化的 DNA 氧化紊乱分析

• 批准号: 03807033
• 负责人: 高取 健彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03807033/
• 关键词: 加齢; DNA; Oh^8dG; マウス賢; ヒト賢

法医実務上,年齢の推定が個人識別を行う上にきわめて重要であり,硬組織を試料とした研究がその主流をしめていた。我々は軟組織からでも年齢を推定できることを明らかにするため,以下の研究を行った。核酸の一種である8ーハイドロキシー2'ーデオキシグアノシン(Oh^8dG)が加齢とともに増加するかをマウスとヒト賢臓を用いて実験した。雌性マウス(BALB/C)を生後0,5,10,15,20,25週ごとに5匹ずつを一群とし,常法に従がい賢臓からDNAを抽出した。抽出したDNAはヌクレア-ゼで処理した後,アルカリホスファタ-ゼ処理し構成成分であるヌクレオシドまで分解した。このヌクレオシド中のOh^8dGをHPLCを用いて測定した。HPLC条件は次のとおり:カラム;Yanapa KODSーA,φ4.6×250,溶離液;10%メタノ-ル含有10mM酸酸アンモニウムBuffer pH5.5,検出器;電気化学的検出器。試料としたヌクレオシドはDNA量として,約200μgをHPLCに導入した。UV検出器では他のヌクレオシドの影響でクロマトグラムはオ-バ-スチ-ルするが,電気化学的検台器を用いると8位のーOHの酸化還元電位により,選括的にOh^8dGを検出し得,1〜100ngの範囲で検量線は直線を示した。マウス賢臓から抽出したDNAのμg当りのOh^8dGのフェムトモル量は10〜100の範囲で増加傾向を示し,正の相関があることが明らかになった。次に当教室で司法解剖した症例の中から20,30,40,50,60,70才台を代表する8試料を選び,マウスと同様に賢臓からDNAを抽出し処理した。ヒトの場合は試料数が少ないこともあるが,総じて加齢とともにOh^8dGは増加し,正の相関があることが明らかになった。ヒトの他の臓器についても検討を加える一方,試料数を多くすることにより,精度を高めていくことを検討中である。

Forensic medical affairs, the presumption of personal identification of the year is important, and the study of hard tissue specimens is mainstream. I believe that soft tissue has become a soft tissue, and the following research has been carried out. Nucleic acid is a kind of nucleic acid 8dG)が加颢とともに尗加するかをマウスとヒト仙蓓を用いて実験した. Female Masuzu (BALB/C) is born at 0, 5, 10, 15, 20, and 25 weeks after birth. It is a group of 5 pieces of ごとに5, and the DNA of the normal method is extracted. After extracting the したDNA はヌクレア-ゼででした, the アルカリホスファタ-ゼprocessingしconstituent であるヌクレオシドまで decomposes した.このヌクレオシド中のOh^8dGをHPLCをmeasured with いてした. HPLC conditions: カラム; Yanapa KODSーA, φ4.6×250, eluent; 10% メタノ-ル containing 10mM acid アンモニウムBuffer pH5.5, extractor; extractor of electrochemistry. The amount of DNA in the sample was the same, and about 200 μg was introduced into the HPLC. The UV output device has the same effect as the UV detectorはオ-バ-スチ-ルするが, 検台器を用いると8 of electrochemical chemistry The acidification and reduction potential of the OH^8dG is obtained, and the range of 1~100ng is shown as a straight line.マウス仙蓓から extracted したDNAのμg りのOh^8dGのフェムトモルquantityはThe range of 10 to 100 means that the trend will increase and the trend will increase, and the correlation will be positive. The forensic anatomy in the classroom is performed in the case of 20, 30, 40, 50, 60, 70. The representative sample is selected from 8 samples, and the DNA is extracted and processed. When the number of samples is small, the number of samples is small, the number of samples is small, and the number of samples is small. Oh^8dGはincreasedし,positiveのrelatedがあることが明らかになった.ヒトのhis の臓器についても検ask for をaddえるside, the number of samples is too many The accuracy is high, the accuracy is high, and the accuracy is high.

项目成果

Takehiko,TAKATORI: "Relationship between aging and amounts of 8ーhydroxyー2'ーdeoxyguanosine in mice and human kidneys" Forensic Sci. Int.

Takehiko, TAKATORI：“小鼠和人类肾脏中衰老与 8-羟基-2-脱氧鸟苷含量之间的关系”《法医科学》。