微量組織からの年齢推定に関する研究:DNAポストラベル化法による解析
基于微量组织的年龄估计研究:使用DNA后标记方法进行分析
基本信息
- 批准号:02807065
- 负责人:
- 金额:$ 1.02万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
- 财政年份:1990
- 资助国家:日本
- 起止时间:1990 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
種々の週齢のウィスタ-系雄性ラット(週齢4〜39週齢)より剔出した肝臓、腎臓、脳から常法に従いDNAを抽出した。抽出したDNAの濃度を33mg/mlに調整し、micrococalnuclease,spleenphosphoーdiesteraseでdeoxyribonucleosideー3'ーmonophosphateに切断した後にヌクレア-ゼP1法により ^<32>Pーポストラベル法を行った。その後正常ヌクレオチドをPEI(ポリエチレンイミン)セルロ-スシ-トと2.3Mリン酸ナトリウム溶液を用いて除去し、求める部分(原点から2.4〜4.8cm)の ^<32>Pの量を液体シンチレ-ションカウンタ-で測定した。全ヌクレオチド数は ^<32>PーポストラベルのあとにPEIセルロ-スシ-トと0.5M塩化リチウム溶液を用いて展開し、原点部分の ^<32>Pの量から算出した。付加体の形成レベルを以下の計算式相対的不可体量=各スポットのcpm/全ヌクレオチドのcpm×希釈率によって求めると、各週齢のラットより剔出した肝臓、腎臓、脳の抽出されたDNAの相対的付加体量と週齢との間にはそれぞれ正の相関関係が見られた。その相関係数rは、肝臓で0.44,腎臓で0.91,脳で0.83であった。本法は通常の ^<32>Pーポストラベル法と比較すると、付加体の二次元展開を省略した筒便法であり、操作も極めて平易なものである。今回の結果はラットのlife sp,anから考えると週齢が若年に集中するきらいはあるが、相対的付加体量と週齢との間に正の相関関係が各臓器で得られたことにより、本法が年齢推定の一つの試みとして有益であると考える。今後ヒト(5〜10歳間隔)においても本法の応用を検討する予定である。
Kind of 々 の weeks 齢 の ウ ィ ス タ - department of male ラ ッ ト (齢 4 ~ 39 weeks 齢) よ り picking し た crucial crucial liver, kidney, 脳 か ら method often に 従 い を DNA extraction し た. Spare し た の DNA concentration を 33 mg/ml に adjust し, micrococalnuclease, spleenphospho ー diesterase で deoxyribonucleoside ー 3 'ー monophosphate に cut し た after に ヌ ク レ ア - ゼ に P1 method Youdaoplaceholder0 よ ^<32>P ポストラベ ポストラベ ポストラベ method を line った. そ の after normal ヌ ク レ オ チ ド を PEI (ポ リ エ チ レ ン イ ミ ン) セ ル ロ - ス シ - ト と 2.3 M リ ン acid ナ ト リ ウ を ム solution with い て, o remove し め る part (origin か ら 2.4 ~ 4.8 cm) の ^ < > 32 P の quantity を liquid シ ン チ レ - シ ョ ン カ ウ ン タ - determination of で し た. Number of full ヌ ク レ オ チ ド は ^ < > 32 P ー ポ ス ト ラ ベ ル の あ と に PEI セ ル ロ - ス シ - ト と 0.5 M salt chemical リ チ ウ を ム solution with い て し and part origin の ^ < > 32 P amount の か ら calculate し た. FuJiaTi の form レ ベ ル を の calculation formula under phase not volume of seaborne = each ス ポ ッ ト の CPM/full ヌ ク レ オ チ ド の CPM rate of x h. 釈 に よ っ て o め る と, each week 齢 の ラ ッ ト よ り picking し た crucial crucial liver, kidney, 脳 の spare さ れ た DNA の phase of seaborne plus size と weeks 齢 と の between に は そ れ ぞ れ is の phase masato masato wearing が ら れ た. Youdaoplaceholder0 そ the correlation coefficient r そ, liver で0.44, kidney で0.91,脳で0.83であった. This law は usually の ^ < > 32 P ー ポ ス ト ラ ベ ル と comparison す る と, FuJiaTi の secondary yuan launched を omit し た tube then method で あ り, operating も め て easy な も の で あ る. Today back の results は ラ ッ ト の life sp, the an か ら exam え る と weeks 齢 に が if years concentrated す る き ら い は あ る が, phase of seaborne plus size と weeks 齢 と に between の is の phase masato masato are が each viscera で should ら れ た こ と に よ り presumption, this law が 齢 の a つ の try み と し て beneficial で あ る と exam え る. In the future, ヒト(with an interval of 5 to 10 years old)にお て て ヒト this law shall use を検 to determine する in accordance with 応.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takehiko,TAKATORI: "Relationship between DNA adducts and aging in liver,kidney and brain of rats." in prepatation for Forensic Sci.Int.
Takehiko,TAKATORI:“DNA 加合物与大鼠肝脏、肾脏和大脑衰老的关系。”
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$ 1.02万 - 项目类别:
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