死後経過時間推定に関する研究:松果体ホルモンの日内リズムの解析応用

死亡后时间估算的研究：松果体激素昼夜节律分析的应用

• 批准号: 01570329
• 负责人: 高取 健彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570329/
• 关键词: メラトニン; ポリクロ-ナル・モノクロ-ナル抗体; RIA; 死後経過時間

死後経過時間の推定法の一つとして、松果体ホルモンであるmelatonin(MT)の日内リズムに着目し、まずその微量測定法を確立する目的で、研究の結果、以下のような成績が得られた。1.MTに対するポリクロ-ナル抗体の作製:6-OHーMTの水酸基に6-braomohexanoic acidを縮合させ、これをBSAに結合させたものを抗原としてウサギに免疫し、ポリクロ-ナル抗体を得、そのラジオイムノアッセイ(RIA)を確立した。(1)[^3H]-MTと[^<125>I]-MTを標識化合物として使用した場合、RIA系で50%阻止するのに必要なMT量は、それぞれ100〜250Pgと400Pgであり、また少なくともそれぞれ2Pgと30Pgまで測定可能であった。(2)本抗体の交差反応性は、[^<125>I]-MTを使用した場合、6-OH-MTにおいて0.4%で、他のMT類似化合物および脳内に生理的に比較的多く含まれる物質とは、全く交差しなかった。2.MTに対するモノクロ-ナル抗体の作製:MTをMannich反応でBSAに縮合させたものを抗原としてBALB/Cマウスに免疫し、モノクロ-ナル抗体を得、そのRIAを確立した。(1)[^<125>I]-MTを使用した場合、RIA系で50%阻止するのに必要なMT量は、1.4ngであり、少なくとも50Pgでは測定可能であった。(2)本抗体はMTに対して特異性が高く、N-acetylserotoninに0.81%交差するのみで、他のMT類似化合物とは全く反応しなかった。3.現在、確立された上記のMTのRIAを用いて、死亡時刻の明らかな死体血および松果体中のMTの濃度を測定し、死後経過時間の応用について検討している。

A method for estimating postmortem elapsed time was developed. The results of this study were summarized as follows: 1. Preparation of MT-specific antibodies: condensation of 6-OH-MT-specific 6-braomohexanoic acid, binding of 6-OH-MT-specific 6-braomohexanoic acid to BSA, binding of 6-OH-MT to BSA, binding of 6-OH-MT-specific 6-braomohexanoic acid, binding of 6-OH-MT to BSA, binding of 6-HT to BSA, binding of 6-OH-MT, binding of 6-HT to BSA, binding of 6- (1)[The <125>amount of MT necessary for the identification of compounds such as [^3H]-MT [^ I]-MT is 100 ~ 250Pg and 400Pg when used in RIA systems. (2)The antibody has <125>a cross-reactivity of 0.4% 6-OH-MT and a cross-reactivity of 0.4% 6-OH-MT and a cross-reactivity of 0.4% 6-OH-MT and 0.4% 6-OH-MT. 2. Production of MT-related anti-BSA antibodies: MT-related anti-BSA anti-MT anti-BSA anti-ELISA (1)[When <125>MT is used, RIA is 50% blocked, and MT is necessary, 1.4ng, and 50pg. (2)This antibody has a high specificity for MT, a 0.81% cross section for N-acetylserotonin, and a complete specificity for other MT analogues. 3. Now, establish the use of MT in the above records, determine the concentration of MT in the blood and pineal gland at the time of death, and investigate the use of MT in the postmortem period.

项目成果

Koichi TERAZAWA: "Production and Characterization of Monoclonal Antibodies Reactive with Melatonin." submitted to J.Immunol.Methods.

Koichi TERAZAWA：“与褪黑激素反应的单克隆抗体的生产和表征。”

Takehiko TAKATORI: "Development of Monoclonal Antibody Reactive with Melatonin." Proceeding of 3rd Indo pacific Congress on Legal Medicine and Forensic Sciences.

Takehiko TAKATORI：“与褪黑激素反应的单克隆抗体的开发。”