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限界的超微量試料からの個人識別:クローン化ミトコンドリア遺伝子による解析

从极少量的样本中进行个人身份识别：使用克隆的线粒体基因进行分析

基本信息

批准号：
04670347
负责人：
高取健彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670347/
关键词：
MtDNA PCR クローン化個人識別腐敗・汚染試料

项目摘要

ミトコンドリア遺伝子の多型性に富むローループ領域の断片を合成したプライマーMt333を用いて、PCR法により増幅後、これをベクターに組み込んでクローン化し、独立したそれぞれのクローン塩基配列を決定することによる異同識別を確立した。微量でしかも腐敗、汚染された実際の法医鑑定試料に本法を応用した結果、きわめて有用な成績が得られ、以下にその成果と問題点を述べる。1.腐敗、汚染されたバラバラ女性妊娠死体(6箇所で切断)の異同識別を行う目的で、マルチローカスDNAフィンガープリント法、シングルローカスVNTR法と本法を応用した。その結果、腐敗のためにDNAの分解が高度であったことから、前二法では異同識別の判定が不可能であったが、本法を用いることにより同一死体由来のものであることが明らかになった。2.一方、別の腐敗、汚染された頭部で切断された男性バラバラ死体においても、本法の有用性が確認された。3.ガーゼに付着した膣内容と精液の陣旧性混合斑の試料について、本法を応用して精子のMt333部のシークエンスの決定を試みた。まず、膣止皮細胞のMtDNAと精子由来のMtDNAとを分離する目的で、SDSにより精子由来のMtDNAをおおまかに分画した。次に、このMtDNAのクローン化を試みたが、多くのクローンは膣上皮細胞由来のMtDNAで、精子由来のMtDNAのクローンを選択することが困難であることが判明した。今後は、目的とするMtDNAの分離とクローン化後の各クローンの効率のよい選択法について検討していくつもりである。

This is due to the fact that the polymorphisms are very rich. In the field, the fragments are synthesized. After the Mt333 is used, the PCR method is used, and the system is used to determine the accuracy of the system. The results of this method are as follows: the results of the results, the results of the results, the results of the results of the method, the results of the results, the results of the results, and the results of the method are described in the following notes. 1. The spoilage and infection of the dead body of the pregnant woman (cut at 6 weeks) is the same as that of the female pregnant body (cut at 6 months). The purpose of this method is the same as that of the DNA method. The VNTR method is applicable. The result of the test, the result of the DNA analysis and the determination of the height of the body, the first two methods and the other two methods determine that it is not possible to cause the same dead body in this method. two。 One party, the other party has failed, and the dyeing department has cut off the body of the male, and the usefulness of this law has confirmed that the body is dead. 3. The content of semen was used to determine the quality of old mixed stains. In this method, we used sperm sperm Mt333 to determine the quality of sperm. The origin of MtDNA sperm, the origin of sperm, the separation of sperm, the separation of sperm, the origin of sperm, the origin of sperm The second, the MtDNA, the second, the second In the future, after the separation of the MtDNA, the rate of each party will be selected.