内皮からの新しいNO遊離調節機構:血管壁内外圧力差

内皮释放NO的新调节机制：血管壁内外压差

• 批准号: 04670128
• 负责人: 中木 敏夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670128/
• 关键词: 内皮細胞; 圧力; 亜硝酸イオン; 硝酸イオン; NO生成酵素; ヒスタミン

血管内皮細胞や平滑筋細胞において、shear stressやstretchを感知するレセプターの存在が推定されている。しかし、血管標品を使用した方法や高血圧モデル動物を使用した方法では、血圧の上昇は血流(sheer stress)及び血管壁張力(wall tension)の上昇を伴い、純粋な圧負荷による作用を検討することは不可能であった。培養血管内皮細胞に、独自に開発したHelium pack methodにより純粋な圧力(pure transmural pressure)のみを負荷することにより、圧感受性mechanoreceptorのみを刺激し、圧負荷に対する内皮細胞の細胞応答を検討した。[方法]ヒト臍帯内皮細胞(HUVEC)を培養し、2代ー4代を使用した。密栓したプラスチックフラスコに圧力計及びヘリウムガスボンベを接続し、壁張力、shear stressを加える事なく、培養細胞に圧力のみを負荷した。EDRF/NOは上清中のNO2^-+NO3^-をGriess法により、測定した。[結果]ヒスタミン刺激によるHUVECのEDRF/NO産生は時間依存的に増加した。EDRF/NO産生は圧力依存的に抑制され、40,80,120,160mmHgでは0.29±0.02,0.11±0.03, 0.11±0.04, 0.06±0.02nmol/30min/flaskであった。実験終了時のtrypan blue exclusion testでは、cellのviabilityは99%以上であった。[考察]内皮細胞において圧力そのものが、高血圧状態でのvascular remodelingの原因の一部である可能性が示唆された。

The presence of vascular endothelial cells and smooth muscle cells is presumed by sensing shear stress and stretch. The method of using vascular markers and high blood pressure animals is to investigate the effects of sheer pressure load on the rise of blood pressure, sheer stress and wall tension. The Helium pack method for culturing vascular endothelial cells independently and under pure pressure is used to investigate the cellular response of endothelial cells to stimulation of pressure-sensitive mechanoreceptors and pressure stress. [Methods] Umbilical endothelial cells (HUVECs) were cultured for 2 to 4 generations. Pressure meter and pressure meter for density measurement, wall tension, shear stress, and pressure measurement for cultured cells EDRF/NO2^-+NO3^-Griess method [Results] The EDRF/NO ratio of HUVEC was increased in time dependent manner. EDRF/NO produced pressure-dependent inhibition rates of 0.29± 0.02, 0.11 ±0.03, 0.11 ± 0.04, 0.06±0.02nmol/30min/flask, 40,80,120,160mmHg. The trypan blue exclusion test is over 99%. [Investigation] Endothelial cells in the middle of the pressure of the heart, high blood pressure state of vascular remodeling is part of the reason for the possibility of this.

项目成果

Hishikawa,K.: "New method of investigating functional roles of pressure-sensitive mechanoreceptor in human endothelial cells" J.Cardiovasc.Pharmacol. 20(Supl12). S66-S67 (1992)

Hishikawa,K.：“研究人内皮细胞中压敏机械感受器功能作用的新方法”J.Cardiovasc.Pharmacol。

Hishikawa,K.: "Transmural pressure inhibits nitric oxide release from human endothelial cells" Eur.J.Pharmacol.215. 329-331 (1992)

Hishikawa,K.：“跨壁压力抑制人内皮细胞释放一氧化氮”Eur.J.Pharmacol.215。