アレルギー性炎症における好酸球の浸潤機構並びに好酸球の炎症反応に対する役割の解析

过敏性炎症中嗜酸性粒细胞的浸润机制及嗜酸性粒细胞在炎症反应中的作用分析

• 批准号: 04670460
• 负责人: 無江 季次
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670460/
• 关键词: ラット好酸球; RBL-2H3細胞; LTB_4; 好酸球増多モデル; 顆粒蛋白質; 脱顆粒反応; 血小板活性化因子

近年、アレルギー性炎症における組織障害には好酸球が大きく関与していることが示唆されてきた。本研究では、抗原刺激による好酸球浸潤に関与する好酸球走化性因子を解析し、さらに、組織傷害を引き起こすと考えられる好酸球顆粒蛋白質の精製及びその放出機序について基礎検討を行った。1.好酸球走化性因子の解析:ラット好塩基性白血病細胞RBL-2H3をIgEで感作した後、対応抗原で刺激すると、1時間をピークとして好酸球走化性因子が産生された。この因子は脂溶性で5ーリポキシゲナーゼ阻害剤によりその産生は抑制されたが、その活性は血小板活性化因子の拮抗剤では阻害されなかった。さらに抗原で刺激して30分後の培養液上清中にはロイコトリエンB_4(LTB_4)が検出され、しかも培養液上清中の好酸球走化活性は、測定された濃度のLTB_4による好酸球走化活性とほぼ一致した。これらの結果から、ラット肥満細胞が抗原刺激後1時間以内に産生する好酸球走化性因子の本体はLTB_4であることが示唆された。2.ラット好酸球の顆粒蛋白質の解析:抗原で感作・惹起することによりラットの腹腔内に好酸球を主体とする白血球浸潤を誘発するモデル(好酸球増多モデル)を開発した。腹腔内浸潤白血球から好酸球を分離し、さらに好酸球顆粒蛋白質を殺菌活性を指標として精製した。これまでに分子量16kD、18kD、及び20kDの顆粒蛋白質を精製し、このうち16kD及び20kDの顆粒蛋白質のN末端アミノ酸配列を決定した。現在さらに18kDのN末端アミノ酸配列の決定を行っている。3.好酸球の脱顆粒反応機序の解析:ラット好酸球の脱顆粒反応についてeosinophil peroxidaseの放出を指標として測定する実験系を確立した。カルシウムイオノフォアA23187は強い脱顆粒反応を誘発したが、血小板活性化因子にはその作用が認められなかった。

In recent years, there have been signs of sexual inflammation, tissue damage, acid ball disease, acid ball disease, and so on. In this study, antigenic stimulation, acid globule immersion and tissue injury were used to analyze the evolutional factors of acid globule and tissue damage. 1. Analysis of the metastatic factors of good acid globule: after the infection of RBL-2H3 IgE in basal leukemia cells was induced, the antigen was used to stimulate the immune response, and the metastatic factor of acid globule was induced in 1 time. Anti-platelet activating factor antagonistic factor, antagonistic factor, antagonist, antagonist. After 30 minutes of stimulation, the supernatant of the culture solution was incubated with the supernatant of the culture solution and the supernatant of the culture solution was tested for the activity of good acid globule migration. The activity of good acid globule migration in the supernatant of the culture solution was determined, and the activity of good acid globule migration was determined. The activity of good acid globule migration was determined in the supernatant of the culture solution, and the LTB_4 activity was determined. The results showed that within 1 hour after the stimulation of cell antigen, the acid globule migration factor was detected by LTB_4 Elisa assay. two。 Antigen analysis: the antigenic effect was to cause the abdominal cavity of the healthy acid globule to infect the abdominal cavity. The main body of the acid globule was immersed in white blood cells. Intraperitoneal immersion of white blood cells, good acid globule separation, good acid globule granule protein, bacterial activity refers to good acid globule, good acid globulin, good acid glob The molecular weight of 16kD, 18kD, 20kD, granulin, sperm, 16kD, 20kD, N-terminal protein, acid collocation and determination. Now that the N-terminal of the 18kD determines the number of rows. 3. Good acid ball threshing anti-eosinophil peroxidase mechanism analysis: good acid ball de-grain anti-grain anti-acid ball release "finger" to determine that the temperature is "confirmed". Anti-platelet activating factor (PAF), platelet activating factor (PAF) and platelet activating factor (PAF).