アレルギー性炎症における好酸球の浸潤機構並びに好酸球の炎症反応に対する役割の解析

过敏性炎症中嗜酸性粒细胞的浸润机制及嗜酸性粒细胞在炎症反应中的作用分析

• 批准号: 04670460
• 负责人: 無江 季次
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670460/
• 关键词: ラット好酸球; RBL-2H3細胞; LTB_4; 好酸球増多モデル; 顆粒蛋白質; 脱顆粒反応; 血小板活性化因子

近年、アレルギー性炎症における組織障害には好酸球が大きく関与していることが示唆されてきた。本研究では、抗原刺激による好酸球浸潤に関与する好酸球走化性因子を解析し、さらに、組織傷害を引き起こすと考えられる好酸球顆粒蛋白質の精製及びその放出機序について基礎検討を行った。1.好酸球走化性因子の解析:ラット好塩基性白血病細胞RBL-2H3をIgEで感作した後、対応抗原で刺激すると、1時間をピークとして好酸球走化性因子が産生された。この因子は脂溶性で5ーリポキシゲナーゼ阻害剤によりその産生は抑制されたが、その活性は血小板活性化因子の拮抗剤では阻害されなかった。さらに抗原で刺激して30分後の培養液上清中にはロイコトリエンB_4(LTB_4)が検出され、しかも培養液上清中の好酸球走化活性は、測定された濃度のLTB_4による好酸球走化活性とほぼ一致した。これらの結果から、ラット肥満細胞が抗原刺激後1時間以内に産生する好酸球走化性因子の本体はLTB_4であることが示唆された。2.ラット好酸球の顆粒蛋白質の解析:抗原で感作・惹起することによりラットの腹腔内に好酸球を主体とする白血球浸潤を誘発するモデル(好酸球増多モデル)を開発した。腹腔内浸潤白血球から好酸球を分離し、さらに好酸球顆粒蛋白質を殺菌活性を指標として精製した。これまでに分子量16kD、18kD、及び20kDの顆粒蛋白質を精製し、このうち16kD及び20kDの顆粒蛋白質のN末端アミノ酸配列を決定した。現在さらに18kDのN末端アミノ酸配列の決定を行っている。3.好酸球の脱顆粒反応機序の解析:ラット好酸球の脱顆粒反応についてeosinophil peroxidaseの放出を指標として測定する実験系を確立した。カルシウムイオノフォアA23187は強い脱顆粒反応を誘発したが、血小板活性化因子にはその作用が認められなかった。

In recent years, there has been a large increase in the number of inflammatory diseases caused by tissue damage. In this study, we conducted a basic study on the relationship between the infiltration and the release of cytosol in response to antigen stimulation, and the analysis of cytosol mobility factors, tissue injury, and the purification and release of cytosol particle proteins. 1. Analysis of cytokinin: cytokinin is produced in RBL-2H3 cells after IgE induction and antigen stimulation. This factor is a lipid soluble inhibitor, and its activity is an inhibitor of platelet activation. After 30 minutes of antigen stimulation, the concentration of LTB_4 in culture supernatant was detected, and the activity of LTC in culture supernatant was determined. The results showed that the production of TLB_4 in vitro was within 1 time after antigen stimulation. 2. Analysis of granular protein of alloglobulin: antigen induction, activation, induction of leukocyte infiltration in alloglobulin main body in abdominal cavity. In the abdominal cavity infiltrates the leucocyte to separate, today the leucocyte particle protein Yang Wei activity index to refine The purification of granular proteins with molecular weights of 16kD, 18kD, and 20kD, and the determination of N-terminal amino acid alignment of granular proteins with molecular weights of 16kD and 20kD Now, the determination of 18kD N-terminal amino acid alignment is in progress. 3. Analysis of the degranulation mechanism of chitosan: the determination of the release index of eosin peroxidase in chitosan degranulation was established A23187 is a strong anti-inflammatory agent and a platelet activating factor.