未熟造血細胞の生存能を増強する新しい骨髄間質由来液性因子(SOAC)の分離精製

分离和纯化一种新的骨髓基质源性体液因子（SOAC），可增强未成熟造血细胞的活力

• 批准号: 05807095
• 负责人: 大塚 毅
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05807095/
• 关键词: 前脂肪細胞; オカダ酸; INF-g; 長期骨髄培養; 単球; IL-4; IL-10

骨髄間質の特徴的な機能である造血幹細胞の維持・新生に携わる因子を同定する過程で、前脂肪細胞株(14F1.1)にはオカダ酸の細胞障害活性を減弱させる活性が存在することが分かり、この物質(SOAC)の分離・精製を試みた。ゲル濾過にて分子量約6万のところに活性を認めたが、イオン交換クロマトグラフィーでは活性分画は明らかでなかった。また、SDS-PAGEでは該当するバンドは明らかでなかった。現在、14F1.1のmRNAより発現ベクターを用いたcDNAライブラリーを作成したので、これを用いてトランスフェクション後の細胞培養上清に対して、SOAC活性のスクリーニングをおこなっている。一方、同じく14F1.1に特有の現象としてIFN-gの存在下にアポトーシスを起こすこと、さらにその現象の伝播が細胞間の接触を通じて行われることを明らかにした論文が掲載された。また、14F1.1を用いた長期骨髄培養系においては、顆粒球・単球系の前駆細胞が生産される。これらの細胞自身も、長期骨髄培養系の維持に対して重要な働きを担っていると考えられる。そこで、単球系細胞の活性酸素産生能やアラキドン酸系カスケードを検討した。その結果、IL-10とIL-4はほぼ同様のメカニズムで上記機能を抑制することが明らかになった。単球からはIL-1やIL-6の様な炎症性サイトカインが産生され、これらはともに造血促進に働き、IL-4もIL-10もこの産生を抑制する。これらの事実はIL-4が長期骨髄培養系における幹細胞維持能を強く抑制するメカニズムを考える上で、貴重な結果を得ることになった。

The function of bone marrow stromal characteristics is to determine the maintenance and regeneration of hematopoietic stem cells, and the activity of preadipocyte cell line (14F1.1) is to reduce the cytoprotective activity of acid. The molecular weight of the filter is about 60,000. The activity of the filter is different from that of the filter. SDS-PAGE is the best way to solve this problem. Now, the mRNA expression of 14F1.1 was detected in the supernatant of cell culture after cDNA synthesis, and SOAC activity was detected in the supernatant after cDNA synthesis. In the presence of IFN-g, the phenomenon of cell contact arises, and the phenomenon of cell contact arises. 14F1.1 is used in long-term bone marrow culture lines, granulocytes and progenitor cells. The maintenance of the cells themselves and long-term bone culture systems is important for the development of bone marrow cells. The active acid production of these cells can be used to investigate the effects of different acid systems. As a result, IL-10 and IL-4 have the same function as each other. In this study, IL-1, IL-6 and IL-10 were used to inhibit the production of inflammatory cytokines, hematopoiesis, and IL-4. IL-4 is a potent inhibitor of stem cell maintenance in long-term bone marrow culture.

项目成果

Nagafuchi S 外: "Depressed interleukin 2-induced cytotoxic activity in patients with chronic EB virus infection" Med.Sci.Res.21. 573-575 (1993)

Nagafuchi S 等人：“慢性 EB 病毒感染患者中白细胞介素 2 诱导的细胞毒性活性降低”Med.Sci.Res.21 (1993)。

Niho Y.外: "Interleukin inhibits functions of activated human monccytes" Mol.Biol.Hem.(印刷中). (1994)

Niho Y. 等人：“白细胞介素抑制激活的人单核细胞的功能”Mol.Biol.Hem.（出版中）。

Niiro H.外: "Interleukin-10 inhibits prostaglandin E2 production by lipopolysaccharide-sti〓lated monccytes." International Immunology. 6(印刷中). (1994)

Niiro H. 等人：“Interleukin-10 抑制脂多糖刺激的单细胞产生前列腺素 E2”，《国际免疫学》6（出版中）。

大塚 毅 外: "IL-10による炎症病変の抑制" 臨床免疫. 26(印刷中). (1994)

Takeshi Otsuka 等人：“IL-10 对炎症病变的抑制”《临床免疫学》26（出版中）。

Nakano T 外: "Transfection of interferon-gamma gene in a mouse bone marrow stromal Preadipocyte cell line causes apoptotic cell death" Experimental Hematology. 21. 1498-1503 (1993)

Nakano T 等人：“小鼠骨髓基质前脂肪细胞系中干扰素-γ 基因的转染导致细胞凋亡”实验血液学 21. 1498-1503 (1993)。