固体高分解能NMR分光法によるペプチドの結晶中における静的および動的構造解折

通过固态高分辨率核磁共振波谱对晶体中的肽进行静态和动态结构分析

• 批准号: 06640665
• 负责人: 内藤 晶
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Himeji Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06640665/
• 关键词: β-ターン構造; インシュリン; エンケファリン; ペプチド; フェニル環; 固体高分解能NMR; REDOR; 重水素NMR

本研究ではβ-ターン構造をとることが知られているN-acetyl-Pro-Gly-Phe、インシュリンのフラグメントであるGly-Phe-Phe、および生理活性ペプチドであるエンケファリンについて、結晶中におけるこれらペプチド分子の静的こよび動的構造解析を固体高分解能NMR分光法を用いて行なった。(1)静的構造解析のために、^<13>C,^<15>Nで二重標識したN-acetyl-Pro-Gly-Pheの核間距離を、回転エコー二重共鳴法(REDOR)を用いて精密に測定した。この時、分子間の標識核からの寄与を考慮することにより、高い精度で核間距離を決定した(Chem.Phys.Lett.,224,729,1994)。立体構造の情報を得るため、4結合離れた核間距離を求め、隣り合うペプチド面の二面角の組み合わせを決定した。また、7結合離れた核間距離の情報から可能な二面角を2種類に限定することが可能となった。この結果、REDOR法で得られた立体構造の1つはβ-ターン構造をとることが判明した。(2)ペプチドの動的構造の情報を得るため、フェニル環を重水素で標識したインシュリンのフラグメントGly-Phe-Pheについて固体重水素NMRを測定した。この結果、水和結晶においてはフェニル環の運動は140℃に上げても観測されなかったが、水和水が結晶から抜けることによって、フェニル環の運動性が格段に高くなることが判明した(J.Mol.Structure,in press)。(3)エンケファリン(Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu)結晶については核磁気緩和時間(T_1,T_<1p>)の測定を行ない、エンケファリン分子の運動性について検討した。この結果、側鎖ではチロシル環がフリップ運動をもつことが判明した。さらに主鎖においてもGly部分は高い運動性をもつことが判明した。N端のTyrは受容体と相互作用することが知られており、本研究からこの部分の運動性の高いことが明らかになった。

In this study, the structure of β-acetyl-Pro-Gly-Phe, β-acetyl-Pro-Gly-Phe, β-acetyl-Phe, β-Phe, β-acetyl-Phe, β-P (1)The structure analysis of static particles <13>was carried out with precision by using <15>the N-acetyl-Pro-Gly-Phe internuclear distance and the reverse-energy double resonance method (REDOR). The intermolecular distance between nuclei is determined with high accuracy (Chem. Phys. Lett., 224,729,1994)。The information of three-dimensional structure is obtained, and the distance between nuclei is determined by the combination of adjacent surfaces and dihedral angles. The information of distance between nuclei is combined with the information of dihedral angle. As a result, the REDOR method has been used to determine the three-dimensional structure. (2)The structural information of the selected molecules was obtained by Gly-Phe-Phe NMR. As a result, water and crystallization are the main factors affecting the mobility of the ring.(J. Mol.Structure,in press) (3)The determination of nuclear magnetic resonance relaxation time (T_1, T_ ) in the crystallization of Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu and the investigation of molecular mobility in Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu <1p>were carried out. The result of this is that the side lock is closed and the ring is closed. The main lock is in the middle of the Gly part, and the high mobility is in the middle of the Gly part. N-terminal Tyr receptor interaction, this study is part of the high mobility of the