細菌鞭毛に特異的な蛋白質輸送機構の分子遺伝学的解析

细菌鞭毛特异性蛋白质转运机制的分子遗传学分析

基本信息

  • 批准号:
    06640798
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

細菌鞭毛のフックと繊維は細胞外に存在するので、それらの構成蛋白質は鞭毛形態形成に際して細胞内で合成された後細胞外へ輸送される必要がある。これらの蛋白質はいずれもいわゆるシグナル・ペプチドをもっておらず、管状構造体である既存の鞭毛構造の中心の穴(チャンネル)を通して輸送されるものと仮定されているが、その分子機構はまだほとんど解析されていない。そこで本研究では分子遺伝学的手法を用いて、鞭毛構造を介した蛋白質の輸送機構を分子レベルで解明することをめざした。1.鞭毛蛋白質輸送に関わる遺伝子flhAとflhBの全塩基配列を決定するとともに、それぞれの産物の特異抗体を作成した。これらをもちいて各遺伝子産物の細胞内局在性を解析したところ、ともに細胞膜内在性の蛋白質であることが証明された。さらに、flhB遺伝子の突然変異により分泌能が変化したものを単離し、その突然変異点を決定することにより、FlhB蛋白質の輸送制御機能ドメインを明らかにした。2.鞭毛特異的輸送系で輸送される最も主要な蛋白質であるフラジェリンについて、その輸送機能ドメインを解析した。発現ベクターを用いてフラジェリンの各領域を細胞内で人為的に大量に合成する系を作成し、各ポリペプチドの培地中への分泌能を検討した。その結果,フラジェリンには独立に機能する2つの輸送機能ドメインが存在することが明らかになった。3.鞭毛形態と輸送経路の関係を明らかにする目的で、種々の鞭毛突然変異体において細胞内で人為的に大量発現させたフラジェリンの細胞外輸送を解析した。その結果、基部構造が形成されていればフラジェリンは輸送されることが判明し、フック構造はフラジェリンの輸送には必ずしも必要でないことが明らかになった。
Flagellar proteins are essential for extracellular transport after intracellular synthesis during flagellar morphogenesis. The protein in the tube structure can be transported through the center of the existing flagella structure, and the molecular structure can be analyzed. This study focuses on molecular genetics, flagellates and protein transport mechanisms. 1. Flagellum protein transport related gene flhA and flhB all base alignment determination, and the production of specific antibodies The analysis of the intracellular properties of the products of these proteins proves that they are intrinsic to the cell membrane FlhB protein transport control function is determined by the sudden change of secretion energy and the sudden change of expression. 2. Flagella-specific transport systems transport the most important proteins and analyze their transport functions. To explore the synthesis of artificial substances in various fields of culture, and to explore the secretion of substances in various fields of culture. As a result, the two transport functions exist independently of each other. 3. Flagellar morphology and transport pathways are clearly defined for purposes, species and flagellates, and intracellular man-made mass production and extracellular transport are analyzed. As a result, the base structure is formed in the middle of the transportation process, and the transportation process is necessary.

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yokoseki,T.: "Role of the FliS protein on the flagellar filament formation in Salmonella typhimurium. (Abstract)" Japanese Journal of Genetics. 69. 777- (1994)
Yokoseki,T.:“FliS 蛋白对鼠伤寒沙门氏菌鞭毛丝形成的作用。(摘要)”日本遗传学杂志。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Minamino,T.: "Molecular characterization of the Salmonella typhimurium flhBoperon and its protein products." Journal of Bacteriology. 176. 7630-7637 (1994)
Minamino,T.:“鼠伤寒沙门氏菌 flhBoperon 及其蛋白质产品的分子特征。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kutsukake,K.: "Isolation and characterization of FliK-independent flagellation mutants from Salmonella typhimurium." Journal of Bacteriology. 176. 7625-7629 (1994)
Kutsukake,K.:“鼠伤寒沙门氏菌中不依赖 FliK 的鞭毛突变体的分离和表征。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kutsukake,K.: "Genetic and molecular analyses of the interaction between the flagellumspecific sigma and anti-sigma factors in Salmonella typhimurium." The EMBO Journal. 13. 4568-4576 (1994)
Kutsukake,K.:“鼠伤寒沙门氏菌鞭毛特异性西格玛和抗西格玛因子之间相互作用的遗传和分子分析。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kutsukake,K.: "Role of the FliA-FlgM regulatory system on the transcriptional control of the flagellar regulon and flagellar formation in Salmonella typhimurium." Journal of Bacteriology. 176. 3598-3605 (1994)
Kutsukake,K.:“FliA-FlgM 调节系统对鼠伤寒沙门氏菌鞭毛调节子和鞭毛形成的转录控制的作用。”
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  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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