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上皮系細胞における糖輸送体の局在とそれを決める因子の分子形態学的研究

上皮细胞糖转运蛋白定位及其影响因素的分子形态学研究

基本信息

批准号：
06670004
负责人：
高田邦昭
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670004/
关键词：
上皮細胞糖輸送体組織細胞化学 GLUT1 GLUT5 ミオイノシトール輸送体SMIT 細胞膜 SGLT1

项目摘要

1.上皮系細胞における糖輸送体の局在をみるために,各種のアイソフォームに特異的な抗体を作製した.アミノ酸配列の分析から得られた結果から,アイソフォーム特異的な約10個のアミノ酸からなるペプチドを合成し,ウサギやモルモットを免疫して抗体を得た.一部の抗体はアフィニティー精製した.2.Na依存性のミオイノシトール輸送体SMITは,腎臓の集合管細胞の基底側壁部細胞膜に局在した.膀胱などの移行上皮ではSMITは主として中間層の細胞の細胞膜に存在した.表皮などの重層偏平上皮でも中間層細胞の細胞膜に分布した.一方同じファミリーのAGLT1は腎臓尿細管上皮細胞の頂部細胞膜に局在した.3.フルクトース輸送体GLUT5は,小腸吸収上皮細胞の頂部細胞膜に局在していた.GLUT5のcDNAをCHO細胞に発現させると細胞膜全周にわたって局在し,GLUT5分子に細胞膜にターゲッティングされる情報があるのが判明した.次にGLUT5のcDNAを極性を持つ腸上皮細胞Caco2細胞で発現させると,頂部細胞膜に局在した.すなわちGLUT5分子を上皮細胞の頂部細胞膜に局在させる情報がその分子自身の中に存在するのが明かになった.GLUT1分子を同様に発現させてもこのような頂部への局在は認められなかった.現在GLUT5とGLUT1のキメラ分子を発現させ,GLUT5の局在を決めるドメインが分子内のどこにあるかを解析中である.

1. Epithelial-line cells contain sugar transporters, and antibodies specific to a variety of enzymes are produced. The results of acid alignment analysis showed that there were about 10 specific acids in the sample. Part of the antibody is purified. 2. Na-dependent antibody transporter SMIT is located in the cell membrane of the basal wall of the collecting duct cells of the kidney. The transitional epithelium of the urinary bladder is characterized by the presence of SMIT and cell membrane in the middle layer. The distribution of cell membrane of middle layer cells in epidermis. The AGLT1 gene was found in the apical cell membrane of renal tubule epithelial cells. The GLUT5 gene was found in the apical cell membrane of small intestine epithelial cells. The GLUT5 gene was found in CHO cells. Next, the cDNA of GLUT5 was found in intestinal epithelial cells Caco2 cells by maintaining polarity, and the top cell membrane was damaged. GLUT5 molecules are present in epithelial cells at the top of the cell membrane. GLUT1 molecules are present at the top of the cell membrane at the top of the cell membrane. Now GLUT5 and GLUT1 have been discovered, and GLUT5 is in the process of resolving the molecular structure.