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神経膜機能の誘導・発現過程に対する蛋白質燐酸化の役割

蛋白质磷酸化在神经膜功能诱导和表达过程中的作用

基本信息

批准号：
06670046
负责人：
高橋國太郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)ホヤ8細胞胚より単離した動物半球頭側割球を用いて、チロシンキナセを活性化するbFGFの作用をホヤNaチャネル遺伝子TuNaI mRNAの発現を指標として調べたところ、電気生理学的なNa電流を指標とした場合と同様に10ng/mlから100ng/mlの範囲で神経誘導作用があることが分かった。また、その誘導作用はmRNA発現からみて、スブチリシンおよび細胞接着によるものと全く同様で、同一の受容体を介すると考えられた.(2)ホヤ2細胞系における相互のギャップ結合の変化をFITC拡散の定量によって解析し,表皮型に分化する場合に急激に増加し、神経型に誘導された場合に消失することはすでに報告した。セリン・スレオニンキナーゼ阻害剤K252aはそのギャップ結合消失のみを抑制するが,一方チロシンキナーゼ阻害剤LavendustinCは表皮細胞における増加のみを抑制し,異なる燐酸化酵素の関与が示唆された。(3)K252aは同時にNa・Kチャネルの発現も遅らせる。そこで、接着により神経誘導を受けた割球に対する作用を再度詳細に調べた.単離し20-25時間に0.5μM K252a与えて培養したところ、通常より僅かであるがチャネルの発現が遅延した。即ち、K252aはギャップ結合の消失過程を特異的に阻害する事により神経分化の機能発現を遅延する以外に、直接的にも神経分化を阻害することがわかった.K252aはチロシンキナーゼであるNGF受容体を抑制することが知られており、チロシンキナーゼ阻害剤LavendustinCは神経誘導時の直前与えると神経分化が抑制されて表皮分化がみられることがわかった.以上のことからチロシンキナーゼは直接的に,ある種のセリン・スレオニンキナーゼはギャップ結合を介して神経分化に影響することが示唆された。(4)Ca蛍光指示薬をもちいてホヤ胚神経誘導2細胞系およびスブチリシン処理割球の神経誘導時点での細胞内Caイオンの変化の測定を試みたが、今のところ明確な変化は認められていない.

(1)8 cell embryos were isolated from the animal hemisphere, and the activity of bFGF was used to determine the expression of NaI mRNA. The activity of bFGF was used to determine the expression of NaI mRNA. The activity of bFGF was used to determine the expression of NaI mRNA. The activity of bFGF was used to determine the expression of NaI mRNA. The activity of bFGF was used to determine the expression of NaI mRNA. The expression of mRNA is induced by the same receptor and the same receptor. (2)2. Cell line interaction, FITC binding, quantitative analysis, epidermal differentiation, rapid increase, neuroinduction, disappearance The inhibitor K252a inhibits the inhibition of epidermal cell binding, and the inhibitor LavendustinC inhibits the inhibition of epidermal cell binding, which is related to the inhibition of phosphorylation. (3) K252a is the same as Na·K·C·C·This is the first time I've ever seen you. 0.5μM K252a at 20-25 min incubation time. That is, K252a has a special inhibition effect on the disappearance process of NGF binding. In addition, K252a has a direct inhibition effect on NGF receptor in the process of NGF binding. LavendustinC is an inhibitor of neurogenesis and neurodifferentiation. The above is a direct result of the interaction between the two groups. (4)Ca The changes of intracellular Ca ~(2 +) in the two cell lines were determined by light irradiation.