ラットグロビン遺伝子群における発生段階及び組織特異的な遺伝子発現の調節機構

大鼠珠蛋白基因组发育阶段和组织特异性基因表达的调控机制

• 批准号: 06670154
• 负责人: 岡崎 太郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670154/
• 关键词: globin gene; promoter; negative element; gene expression; CAT assay; LCR; rat

本研究は単年度申請であるが、我々がこれまでに構造を明かにしてきた多様なラットグロビン遺伝子の、発生段階および組織特異的な発現制御機構に関して諸種の解析を行い、以下の成果を得た。1.ラット^<II>β、^<III>β、及び^Oβ遺伝子の5'上流約700bpに至る領域についての諸種のdeletion mutantを作成、これを挿入したCAT constructをMEL cellに導入してCAT assayを行った結果、^<II>βに関しては-242〜-170(72bp)の間に、^<III>βに関しては-190〜-156(34bp)の間に、^0βに関しては-185〜-151(34bp)の間にそれぞれnegative element(NE)の存在が推定された。2.上記NEのscquenceは従来の報告に無いuniqueなものであり、^<III>βと^0Bのsequenceは互いに一致した。3.^<II>β、^<III>BのNEをprobeとして、MEl nuclear extractを用いたgel shiftassayの結果、^<II>β、^<III>B、^0BのNEには同一の転写因子が作用するものと思われた。4.上記NEはいずれもposition dependent、orientation independentに作用した。5.^<II>βNEの効果はHcLa cellでは認められず、crythroid cell specificであった。6.各NEは、MEL及びK562 cellで同様の活性を示した。すなわち、この作用因子はマウス→ヒトの進化過程で保存されていることが示唆された。7.ラットβLCRIIについて、PCR法を補助手段として、単離同定した。この領域はマウスLCRIIと96%のhomologyを有したが、ヒト、マウスとは異なって、cpsilonグロビン遺伝子の5'上流約4.5kbに存在した。

This study was conducted on the basis of an annual application for the analysis of various types of genetic, developmental, and tissue-specific development control mechanisms. The following results were obtained. 1. The deletion mutants of ^<II>β,^<III>β, and ^Oβ genes were constructed and introduced into MEL cells from about 700bp up to 5'upstream of CAT construct, and the results of CAT assay were analyzed.<II>^β was estimated to exist between-242 and-170 (72bp)<III>,^ β was estimated to exist between-190 and-156 (34bp), and ^0 β was estimated to exist between-185 and-151 (34bp). 2. Note <III>that there is no unique sequence in the report. 3.^ <II>β,<III><II>^B,<III>^0B and NE are the same as the gel shiftassay. 4. Note that NE has a position dependent, orientation independent role. 5.^ <II>βNE HcLa cell 6. Each NE, MEL and K562 cell showed the same activity. The evolutionary process of the gene is preserved. 7. β-LCRII, PCR method, complementary means, separation and determination 96% of the homology of this domain exists in the 5'upstream of LCRII, which is about 4.5kb.

项目成果

猪口,直美: "ラット成体型グロビン遺伝子の構造:β様グロビン遺伝子の単離と構造解析" 日本医科大学雑誌. 61. 620-632 (1994)

Inoguchi, Naomi：“成年大鼠珠蛋白基因的结构：β样珠蛋白基因的分离和结构分析”日本医科大学杂志 61. 620-632 (1994)。