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ラットヘモグロビンの多様性に関する分子生物学的研究

大鼠血红蛋白多样性的分子生物学研究

基本信息

批准号：
63570123
负责人：
岡崎太郎
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1990
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は申請の最終年度に当たるが、昨年度に引き続いて順調に実験を行い、申請課題について、年期の目標をほぼ完全に達成することが出来た。本年度に得られた結果は以下のごとくである。1.ラットグロビン遺伝子群の単離と構造解析:(1)全長30kbをcoverするoverlapping clone上に4個のembryo 型βグロビン遺伝子座を確認し、そのすべてについてfianking regionを含む全塩基配列を決定した。また各々の相対位置を確定した。このうち5'上流の3個(ε1,ε2,ε3)はpromoterおよび全転写領域にわたって完全な構造を有し、一方下流の1個(ψβp)はcodon66の位置に25bpの欠失を有する偽遺伝子と考えられた。(2)全長60kbをcoverするoverlapping clone上に見いだした合計7個のadult型βグロビン遺転子座のすべてについて、flanking regionを含む全塩基配列を決定すると共に、その相対位置を確定した。これらは1個の偽遺伝子(ψβr)を除いて、いずれも発現に充分な遺伝構造を有し、先に蛋白質レベルで同定されているOβ,IIβ,IIIβーグロビンにそれぞれ対応する配列を有することが確かめられた。2.ラットembryo型ヘモグロビンの構造解析とヘモグロビン転換:(1)胎生期ラット血液より4種のembryo型ヘモグロビンを単離し、3種の構成グロビン鎖(ζ,E1,E3)の全一次構造を決定した。このうち、ζ鎖は今回初めてその存在が明らかになり、またE1,E3 鎖はそれぞれ上記のε1およびε2遺伝子の塩基配列と一致し、両遺伝子が胎生期に実際に発現していることが明示された。(2)胎生各期におけるグロビン鎖の同定から、embryo→adult型へのヘモグロビン転換の過程を明らかにした。3.以上により、従来の結果と併せて、ラットにみられるヘモグロビンの多様性に関し、embryo型を含む構成グロビン鎖の一次構造と、これをコ-ドするグロビン遺伝子群の構成のほぼ全容を解明するに至った。

This year, the application for the final year of the year, the introduction of the year, the implementation of the application for the project, the completion of the year's objectives, and the completion of the project. This year's results 1. Structure analysis of the chromosome fragment subgroup:(1) Four embryo-type beta chromosome fragments on the overlapping clone with a total length of 30kb were identified and the fianking region was determined including the complete nucleotide sequence. The position of each side is determined. Three (ε1,ε2,ε3) promoters in the upper stream of codon 5', and one (ε βp) promoter in the lower stream of codon66 are missing 25bp. (2)A total of 7 adult-type beta loci were identified on the 60kb overlap clone, including the flanking region, the total number and the relative position. This is because there is a pseudogene (φ βr) in the middle of the protein sequence, and there is a protein sequence in the middle of the protein sequence. 2. Structural analysis and transformation of embryo type:(1) The determination of the whole primary structure of embryo type lock (eta,E1,E3) during fetal period. The existence of this lock at the beginning of the present time is clearly indicated by the E1,E3 lock. The ε1, ε2 gene is assigned to the base of the birth, and the gene is present in the birth period. (2)The process of embryonic to adult development in all stages of life is clearly defined. 3. The results of the above are as follows: 1. The diversity of the group is related to the embryo type, including the primary structure of the group lock, and 2. The total content of the group is explained.