遺伝子近傍の多型性を利用したMVR-PCR法による微量混合斑痕からのアリル分析

使用 MVR-PCR 方法利用基因附近的多态性对微量混合点进行等位基因分析

• 批准号: 06670455
• 负责人: 玉木 敬二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670455/
• 关键词: 法医学; MVR-PCR; DNAタイピング; 個人識別; ミニサテライト; MS32; アリル分析

DNAフィンガープリント法に始まるミニサテライトDNAを用いた検査法は個人識別などの法医学領域で広く利用されているが、現在のところ個々のミニサテライトの長さの差のみを情報として使用している。ところが、ミニサテライトの内部の変異をマッピングするMVP-PCR法の開発により、さらに多くの情報が得られるようになった。また、ミニサテライト近傍(フランキング領域)の多型性を利用することにより、ゲノムDNAから個人のアリルをタイプできるようになった。我々はこれらの方法を用いて日本人のMS32アリルを数多く調査し、血痕や精液班などの微量な法医資料の分析にも応用し検討した。また、これらの研究結果をもとに、実際の法医資料の分析に応用した。全身に火傷を覆い腐敗も進んだ身元不詳の嬰児が分離された胎盤とともに焼却炉内で発見されたが、この2つの法医資料よりどれだけ個人識別に有用な情報が得られるかを検討した。まず、比較のために従来のDNA検査(SLP、AmpFLP、HLA-DQA1、STR)をおこなったが、HLA検査を除く3つの検査では胎盤だけに存在するアリルを検出されず、嬰児のDNA型のみがタイピングされた。また、HLA検査では3つ以上のアリルの混合が示唆されたが、それぞれ実際のDQA1型を決定できなかった。それに対し、通常のMVR-PCRでは嬰児DNAからは明確なdiploidコードを読み取ることができ、2つのアリルを分離してhaploidコードを読むことも可能であった。また、胎盤組織では3つ以上のアリルが混合していることがわかり、上記3つのフランキング(近傍)領域の多型性をタイピングしたところ、嬰児DNAと胎児DNAで異なっていたため、アリル特異的MVR-PCRにより、胎盤に含まれる微量な母親由来のアリルのタイピングに成功した。これらのアリルをデータベース内にある今までにタイピングされたアリルと比較したところ、ホモロジーの高いアリルは日本人のアリルだけであった。このため、嬰児や母親は日本人である可能性が強く示唆された。このように、混合斑痕などの3つ以上のアリルの混ざった資料からでも、フランキング多型を用いることによりアリルの分離及びマッピングが可能となり、MVR-PCR法は極めて個人識別能の高い検査であることが示された。

DNA フ ィ ン ガ ー プ リ ン ト に starting ま る ミ ニ サ テ ラ イ ト を DNA with い た 検 check method は personal identification な ど の で forensic medicine hiroo く using さ れ て い る が, now の と こ ろ a 々 の ミ ニ サ テ ラ イ ト の long さ の poor の み を intelligence と し て use し て い る. と こ ろ が, ミ ニ サ テ ラ イ ト の internal の - different を マ ッ ピ ン グ す る MVP - PCR method の open 発 に よ り, さ ら に more く の intelligence が ら れ る よ う に な っ た. ま た, ミ ニ サ テ ラ イ ト nearly alongside (フ ラ ン キ ン グ) の polytypism を using す る こ と に よ り, ゲ ノ ム DNA か ら personal の ア リ ル を タ イ プ で き る よ う に な っ た. I 々 は こ れ ら の way を with い て Japanese の MS32 ア リ ル を more く investigation し, blood や semen class な ど の trace な の forensic data analysis に も 応 with し beg し 検 た. Youdaoplaceholder0, れら, <s:1> research results を とに とに, practical <s:1> forensic data <e:1> analysis に応 use た た. Systemic に sharing を fu い corruption も into ん だ body yuan is unknown の baby where が separation さ れ た placenta と と も に 焼 but furnace で 発 see さ れ た が, こ の 2 つ の forensic data よ り ど れ だ useful け personal identification に な intelligence が ら れ る か を beg し 検 た. ま ず, comparative の た め に 従 検 check to の DNA (SLP, AmpFLP, HLA DQA1 and STR) を お こ な っ た が, HLA 検 を except く 3 つ の 検 check で は placenta だ け に exist す る ア リ ル を 検 out さ れ ず, baby where の DNA type の み が タ イ ピ ン グ さ れ た. ま た, HLA 検 で は above 3 つ の ア リ ル の mixed が in stopping さ れ た が, そ れ ぞ れ be interstate の DQA1 を defined で き な か っ た. そ れ に し seaborne, usually の MVR PCR - で は baby where DNA か ら は clear な diploid コ ー ド を 読 み take る こ と が で き, 2 つ の ア リ ル を separation し て haploid コ ー ド を 読 む こ と も may で あ っ た. ま た, placental tissue で は above 3 つ の ア リ ル が mixed し て い る こ と が わ か り, written 3 つ の フ ラ ン キ ン グ (nearly) split fields の polytypism を タ イ ピ ン グ し た と こ ろ, baby where DNA と tire where DNA で different な っ て い た た め, ア リ ル specific MVR PCR - に よ り, placenta に ま れ る trace な mother origin の ア リ ル Youdaoplaceholder0 ピ ピ グに グに success た た. こ れ ら の ア リ ル を デ ー タ ベ ー ス within に あ る today ま で に タ イ ピ ン グ さ れ た ア リ ル と compare し た と こ ろ, ホ モ ロ ジ ー の high い ア リ ル は Japanese の ア リ ル だ け で あ っ た. <s:1> ため, the mother of the baby 児や is である Japanese である possibility が strong く hint された. こ の よ う に, mixed flecked な ど の above 3 つ の ア リ ル の mixed ざ っ た data か ら で も, フ ラ ン キ ン グ polymorphism を with い る こ と に よ り ア リ ル の separation and び マ ッ ピ ン グ が may と な り, MVR PCR method は extremely め て personal identification can の high い 検 check で あ る こ と が shown さ れ た.

项目成果

Keiji Tamaki: "Applications of minisatellite variant repeat(MVR)mapping for maternal identification from remains of an infant and placenta." Journal of Fovensic Sciences. (in press). (1995)

Keiji Tamaki：“应用小卫星变异重复 (MVR) 作图从婴儿和胎盘残骸中识别母体。”