膜脂質過酸化のアセチルコリン電流傷害機序

乙酰胆碱电流膜脂过氧化损伤机制

• 批准号: 06670744
• 负责人: 西村 昌雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670744/
• 关键词: アセチルコリン; 膜脂質過酸化; 電圧固定法; GTP結合タンパク

副交感神経系による心機能の調節が、活性酸素存在下でどのように影響されるかを検討するため、副交感神経系の最終的作用部位の一つであると考えられる、アセチルコリン感受性カリウムチャネルに対する活性酸素生成系の効果を検討した.ウサギ又はモルモットの心房筋を酵素処理により分離し、単一心房筋細胞を作成、生理的条件下に、全膜細胞電位固定法により膜電流を記録した.電極内液にGTP結合蛋白質の非可逆的活性化物質であるGuanosine5'-O-(3-thiotiphospate(GTP-γS)10μMを添加、40mVに膜電位を保持し膜電流の時間経過を計測すると、記録開始時には外向き電流はほとんど計測されなかったが、時間と共に増加し、3ないし5分後に最大となり、その後やや減少した後ほぼ定常状態に達した(n=6).記録開始時と外向き電流増加後の定常状態で、膜に種々の電位への可分極又は脱分極パルスを加え電流電圧曲線を作成、保持電位以下の直線部分で比較すると、Slcpeconductanceは175±12%増加していた.この後、活性酸素生成系である、t-Butylhydroperoxyde(TBH)をO_2存在下で灌流液に添加したところ、膜電流は用量依存性に減少し、100μMの薬剤作用下ではSlopeconductanceは作用前に対して、35±7%減少した.ウサギ又はモルモットの心房筋には、内向き整流性カリウムチャネルは少なく、GTP-γSにより活性化された電流はほぼ純粋にアセチルコリン感受性カリウムチャネルを通る電流と考えられる.GTP-γS存在下では、GTP結合蛋白質までの副交感神経活動に関与する因子がいかなる状態であっても、チャネルに対する活性化刺激は影響を受けないと考えられるので、TBHにより生成された活性酸素はチャネル自体、又はチャネルとGTP結合蛋白との相互作用に影響を及ぼし、副交感神経による心筋活動の調節を減弱させるものと考えられた.

The regulation of cardiac function in the parasympathetic nervous system, the influence of active acid in the presence of active acid, the final action site of parasympathetic nervous system, the effect of active acid production system in the presence of active acid. The membrane currents were recorded under physiological conditions and by the whole-membrane cell potential fixation method. The irreversible activation substance of GTP binding protein in the electrode solution was added to Guanosine 5'-O-(3-thiophosphate (GTP-γS)10μM, the membrane potential was maintained at 40mV, the membrane current was measured over time, the outward current was measured at the beginning of recording, the measurement time increased, the maximum was measured after 3 minutes, and the maximum was measured after 5 minutes. At the beginning of recording, the steady state after the outward current increases, the polarizable and depolarizable potential of the film, the increase of the current voltage curve, and the linear portion below the holding potential increase by 175±12%. After that, the active acid production system decreased with the addition of t-Butylhydroperoxy (TBH) in the presence of O_2, and the membrane current decreased with the addition of TBH in the presence of O_2. The slopconductivity decreased by 35±7% in the presence of 100μM TBH. In the presence of GTP-γS, the factors involved in the parasympathetic activity of GTP binding proteins are changed. The effects of activation stimulation on the production of TbH, TbH, T

项目成果

西村 昌雄,小山 豊,臼井 浩明: "膜脂質過酸化のアセチルコリン電流傷害機序" 日本循環器学会. (発表予定). (1996)

Masao Nishimura、Yutaka Koyama、Hiroaki Usui：“膜脂过氧化的乙酰胆碱电流损伤机制”日本循环学会（演示文稿预定）。