原因不明の遺伝性非球状性溶血性貧血の遺伝子レベルでの病因解明

从基因水平阐明不明原因遗传性非整体性溶血性贫血的发病机制

• 批准号: 06671112
• 负责人: 藤井 寿一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671112/
• 关键词: 溶血性貧血; 赤血球酵素異常症; ピルビン酸キナーゼ異常症; 変異酵素; 構造異常; ミスセンス変異; スプライシング変異; フレームシフト変異

ピルビン酸キナーゼ(PK)異常症は解糖系酵素異常症のなかで最も頻度が高い疾患で、現在までにわれわれは76家系(米国白人1家族)発見している。血族結婚が認められる18家系のうち11家系、血縁関係の認められない58家系のうち16家系、他施設で発見された外国人3家系の計30家系について遺伝子解析を施行した。ホモ接合型PK異常症は解析した中で14家系あり、ミスセンス変異7種、スプライシング変異1種、フレームシフト変異1種が同定された。今年度新たに同定したホモ接合型PK異常症3家系は2家系が1261A(Q421K)変異、1家系が1276T(R426W)変異を有していた。1261A変異は今回の2家系を含め計5家系に同定され、ホモ接合型症例で最も頻度の高い変異である。1261A変異のホモ接合体5家系について、1705A/C塩基多型を調べたところ、C/Cのホモ接合体が3家系、A/Cのヘテロ接合体が2家系と一致していないことから、これらの変異は異なる起源と考えられる。PK Naniwaは家族歴で血縁関係が認められないが、両アリルに1276T変異が同定された。この変異によって、1277A変異のホモ接合体であるPK Sapporo(R426Q)と同じ426番目のArg残基に置換が生ずる。PK Naniwa、PK Sapporoの赤血球PKの酵素学的諸性質は基質親和性とアロステリック活性化の両方が障害される点で一致していた。PK Hoenzakaは小児期に著明な肝脾腫を指摘され、摘脾前には頻回の輸血を必要とした重症例で、酵素学的検索では赤血球PKはフルクトース-1,6-二リン酸による活性化が著しく障害されていた。本例は841A(D281N)、1698A(N566K)の複合ヘテロ接合体であることが明らかになった。841Aは保存的なアミノ酸の置換を生ずるのに対し、1698Aはサブユニット間結合に重要なCドメインにおいてペプチドの疎水性を増加させ、アロステリック活性化が障害されるものと考えられる。以上、今年度はPK異常症の構造異常と機能異常の関係を明らかにした。

The most frequent abnormality of glucose-hydrolyzing enzymes was found in 76 families (1 white American family). 18 families of kinship marriages, 11 families of kinship relationships, 58 families of kinship relationships, 16 families of kinship relationships, and 30 families of alien marriages were analyzed. In the analysis of heterozygous PK abnormalities, there were 14 families, 7 species, 1 species and 1 species. This year, the same pattern was observed in 3 families with heterozygous PK abnormality, 2 families with heterozygous PK abnormality and 1 family with heterozygous PK abnormality, 1261A (Q421K). 1261A variant is present in 2 families, including 5 families, with the highest frequency of variant cases. 1261A/C heterozygote 5 families, 1705A/C heterozygote 3 families, A/C heterozygote 2 families, identical, heterozygote origin PK Naniwa family members are related to each other. This variant has a PK Sapporo(R426Q) and an Arg residue substitution at 426A. PK Naniwa, PK Sapporo erythrocytes PK enzyme properties are consistent with matrix affinity, activation and inhibition. PK Hoenzaka is an early warning of liver and spleen swelling, frequent blood transfusion before splenectomy, and enzymatic detection of red blood cell PK activation. In this example, 841A (D281N) and 1698A (N566K) were combined. 841A is concerned with the preservation of the acid substitution, 1698A is concerned with the protection, The relationship between structural abnormality and functional abnormality of PK abnormality is clear.

项目成果

Hirono A,Fujii H and Miwa S: "Identification of two novel deletion mutations in glucose-6-phosphate dehydrogenase gene causing hemolytic anemia." Blood. (in press).

Hirono A、Fujii H 和 Miwa S：“鉴定出导致溶血性贫血的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因中的两个新缺失突变。”

Hirono A,Miwa S,Fujii H,et al.: "Molecular study of eight Japanese cases of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency by non-radioisotopic SSCP analysis." Blood. 83. 3363-3368 (1994)

Hirono A、Miwa S、Fujii H 等人：“通过非放射性同位素 SSCP 分析对八个日本葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症病例进行分子研究。”

Kanno H,Ballas SK,Miwa S,Fujii H and Bowman HS: "Molecular abnormality of erythrocyte pyruvate kinase deficiency in the Amish." Blood. 83. 2311-2316 (1994)

Kanno H、Ballas SK、Miwa S、Fujii H 和 Bowman HS：“阿米什人红细胞丙酮酸激酶缺陷的分子异常。”

Kanno H,Fujii H,Miwa S,et al.: "Hereditary hemolytic anemia caused by diverse point mutations of the pyruvate kinase gene found in Japan and Hong Kong." Blood. 84. 3505-3509 (1994)

Kanno H、Fujii H、Miwa S 等人：“在日本和香港发现的由丙酮酸激酶基因的多种点突变引起的遗传性溶血性贫血。”

Hirono A,Fujii H,and Miwa S: "The cellulose treated blood sample is a good source of DNA for molecular analysis." American Journal of Hematology. 46. 252-253 (1994)

Hirono A、Fujii H 和 Miwa S：“纤维素处理的血液样本是进行分子分析的良好 DNA 来源。”