权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

グルコ-スー6ーリン酸脱水素酵素変異種を指標としたわが国への遺伝子移子移込の検討

考虑使用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶变体作为指标将基因转移到日本

基本信息

批准号：
02671048
负责人：
藤井寿一
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

グルコ-スー6ーリン酸脱水素酵素(G6PD)異常は、薬剤惹起性溶血発作ないし慢性溶血を伴うことのある赤血球酵素異常症であるが、大半は何ら臨床症状は呈さない。本酵素異常はアフリカ、地中海沿岸、東南アジアにおいて特に頻度が高く、世界で4億人以上が本酵素の異常遺伝子をもつと考えられている。G6PD異常症の病因解明は世界各国で進んでおり、既に20種の変異酵素遺伝子で塩基置換が同定されている。今年度はわが国で比較的頻度が高いG6PD UbeとG6PD Konanなどの変異酵素遺伝子が既知の塩基置換を有しているかどうかをpolymerase chain reaction法(PCR法)を用いて検索し、わが国で発見した変異G6PDと諸外国、特に東南アジアで頻度が高い変異酵素との異同を遺伝子レベルで検討し、わが国への遺伝子移入を明かにする事を目的に研究を進めた。G6PD Konan、G6PD Tokyoおよび未同定の2例の変異酵素を有するG6PD異常症患者白血球より染色体DNAを精製し、塩基置換により制限酵素切断部位の変化しているG6PD A^+、G6PD A^ー、G6PD Mahidol、G6PD Metaponto、G6PD Riverside、G6PD Tomah、G6PD Beverly Hillsの7種の変異酵素に特異的な各塩基置換部位を含む80〜400bpの塩基配列を、合成オリゴヌクレオチドプライマ-(22ーmer)を用いたPCR法にて増幅した。増幅DNAは各変異部位に特異的な制限酵素で処理したのち、ポリアクリルアミドゲル電気泳動にて分離、銀染色法により検出し、制限酵素切断パタ-ンより各塩基置換の有無を判定した。今回、対象とした4種の日本人G6PD変異酵素遺伝子DNAは、検索した7種の変異酵素遺伝子DNAに特異的な制限酵素切断パタ-ンは見られず、既知の塩基置換を有していない事が明らかになった。すなわち、これら4種の日本人G6PD異常症の病因は未知の部位の塩基置換で、日本人に固有の変異酵素である事が強く示唆された。現在、これら日本人の変異G6PD遺伝子について、変異部位の決定を進めている。

Abnormality of G6PD (G6PD), chronic hemolytic disease caused by G6PD Sexual hemolysis is associated with Erythrocytic Enzyme Abnormality, and most of the symptoms are clinical. The frequency of this enzyme abnormality is high in the Mediterranean coast, Southeast Asia, and more than 400 million people in the world have this enzyme abnormality. The cause of G6PD abnormality has been elucidated and has been developed in various countries around the world, and 20 types of isozymes have been identified together with base replacement. The frequency of this year's country comparisons is high. Ube G6PD Ube G6PD Konan isoenzyme chain. The reaction method (PCR method) is used in various foreign and special applications Degreeが高い変different enzymesとのsimilarities and differencesを伝子レベルで検questionし、わが国への缝子 moved intoを明かにする事をpurposeに研究を入めた. G6PD Konan, G6PD Tokyo および不同定の2 cases の変isozyme を有するG6PD abnormality patient leukocyte chromosomal DNA を purification し, hydroxyl substitution により restriction enzyme cutting site の変化しているG6PD A^+、G6PD A^ー、G6PD Mahidol、G6PD Metaponto、G6PD Riverside、G6PD Tomah、G6PD Beverly Hills' 7 kinds of isozymes are specific, and each hydroxyl group substitution site contains a hydroxyl group array of 80 to 400 bp.を. Synthesis of オリゴヌクレオチドプライマ-(22ーmer)を was carried out using the PCR method. Amplified DNA is processed with restriction enzymes that are specific for each different site, and the DNA is processed using restriction enzyme electrophoresis. Animal separation, silver staining method, restriction enzyme cutting method, and restriction enzyme cutting method are used to determine the presence or absence of each hydroxyl group substitution. This time, we have 4 kinds of Japanese G6PD different enzymes and DN of Japanese G6PD, and 7 kinds of different enzymes and DN of 検SO Aに-specific な restriction enzyme cuts the パタ-ンは见られず, and the known の塩 radical substitution を有していない事が明らかになった. There are 4 types of Japanese G6PD abnormality, including no known causes, no known parts of the disease, no serotonin substitution, and Japanese inherent enzymes. Now, the これらJapanese の変different G6PD legacy 伝子について, the 変different part のdetermination を入めている.