シェ-グレン症候群におけるT細胞機能の解析:接着分子を介したシグナル伝達機能

干燥综合征 T 细胞功能分析：粘附分子的信号转导功能

• 批准号: 06671899
• 负责人: 梅原 久範
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671899/
• 关键词: シェ-グレン症候群; T細胞; 接着分子; シグナル伝達; チロシンキナーゼ

シェ-グレン症候群においては,唾液腺内でT細胞のモノクローナルな増生や各種サイトカインの産生などが報告されている.炎症性サイトカインは血管内皮細胞でのICAM-1など接着分子のリガンドの発現を増強させることがわかっている.われわれは,接着分子の一つであるLFA-1が細胞の増殖に必要なシグナルを伝達することを明らかにしてきた.今回,接着分子を介する刺激によるシェ-グレン症候群患者のT細胞機能を検討する目的で,まずヒトT細胞株(Jurkat)を用いて検討した.Jurkat細胞を固層化したCD3抗体とLFA-1抗体で架橋刺激し,細胞内蛋白のチロシンリン酸化状態と細胞骨格成分の凝集に重要なチロシンキナーゼであるp125^<FAK>の活性を検討した.CD3抗体の架橋により,60kD,85kD,120kDの新たなチロシンリン酸化蛋白の出現を認めた.免疫沈降したp125^<FAK>のチロシンリン酸化は,CD3抗体の架橋刺激により出現し,LFA-1抗体とCD3抗体の同時架橋刺激により増強する傾向が認められた.この変化は,LFA-1抗体の用量依存性を示した.またp125^<FAK>活性を放射標識正リン酸を用いたIn vitro kinase assayにて検討すると,チロシンリ酸化の結果と同様にCD3抗体とLFA-1抗体の同時架橋により,強いチロシンキナーゼ活性の誘導が認められた.このことより,接着分子のT細胞活性化にp125^<FAK>が関与している可能性が示唆された.今後,T細胞活性化に接着分子を介した細胞骨格成分の凝集が必要不可欠であるかを明らにし,シェ-グレン症候群患者細胞T細胞と正常者T細胞との差異を明らかにする予定である.

シ ェ - グ レ ン syndrome に お い て は, で T cells within the salivary gland の モ ノ ク ロ ー ナ ル な rights have や サ イ ト カ イ ン の produce な ど が report さ れ て い る. Inflammatory サ イ ト カ イ ン は endothelial cells で の ICAM - 1 な ど then molecular の リ ガ ン ド の 発 を now raised strong さ せ る こ と が わ か っ て い る. わ れ わ れ は, then the molecular の a つ で あ る が LFA - 1 cell の に necessary rights colonization な シ グ ナ ル を 伝 da す る こ と を Ming ら か に し て き た. Today back, then the molecular を interface す る stimulus に よ る シ ェ - グ レ ン syndrome patients の t-cell function を beg す 検 で る purpose, ま ず ヒ ト T cell lines (Jurkat) を い て beg し 検 た. Jurkat cells を fixed aliquation し た CD3 antibodies と LFA - 1 antibodies で stimulate し bridge, intracellular protein の チ ロ シ ン リ ン acidification condition と cells Bone composition の agglutination に important な チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ で あ る p125 ^ < FAK (> の active を beg し 検 た. の CD3 antibody bridging に よ り, 60 kd, 85 kd, 120 kd の new た な チ ロ シ ン リ ン acidic protein の appear を recognize め た. Immune sink し た p125 ^ < FAK (> の チ ロ シ ン リ ン acidification は, CD3 antibodies の bridging stimulus に よ り し, LFA - 1 antibodies と CD3 antibodies の bridge at the same time stimulate に よ り raised strong す る tendency が recognize め ら れ た. こ の - は, LFA - 1 antibodies の dosage dependence を shown し た. ま た p125 ^ < FAK (> active を put To mark the positive リ を acid を with リ たIn vitro kinase Beg す assay に て 検 る と, チ ロ シ ン リ acidification と の results with others in に CD3 antibodies と LFA - 1 antibodies の and bridging に よ り, strong い チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ active の induced が recognize め ら れ た. こ の こ と よ り, then the molecular の T cell activation に p125 ^ < FAK (> が masato and し て い が る possibility in stopping さ れ た. In the future, T cell activation に then molecular を interface し た cells bone composition の agglutination が need not owe で あ る か を Ming ら に し, シ ェ - グ レ ン syndrome cells called T cells in patients with normal と t-cell と の differences を Ming ら か に す る designated で あ る.

项目成果

梅原 久範: "LFA-1-mediated signal transduction" Medical Immunology. 28. 403-411 (1994)

Hisanori Umehara：“LFA-1 介导的信号转导”医学免疫学 28. 403-411 (1994)。

梅原 久範: "細胞間接着とCo-stimulatory Signal" BIOTHERAPY. 8. 966-974 (1994)

Hisanori Umehara：“细胞间粘附和共刺激信号”生物疗法。8. 966-974 (1994)