自己免疫疾患におけるLipid raftを介した細胞活性化の解析とその制御法の開発

自身免疫性疾病中脂筏介导的细胞活化分析及其控制方法的开发

• 批准号: 04F04244
• 负责人: 梅原 久範
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04244/
• 关键词: リピッドラフト; アポトーシス; 全身性エリテマトーデス; スフィンゴミエリン; 自己免疫異常

本研究は,全身性エリテマトーデスにおける免疫異常を細胞活性化シグナル伝達の中心である細胞膜lipid raft(ラフト)の面から明らかにすることにある.基礎的検討として,ラフトのアポトーシスシグナルにおける重要性を検討した.このために,Fas発現WR19L細胞よりスフィンゴミエリン欠損株WR/Fas-SM(-)を樹立し,我々がクローニングしたsphingomyelin synthase gene (SMS-1) (J.B.C.279:18688-18693,2000)を遺伝子導入したスフィンゴミエリン合成回復株(WR/Fas-SMS1)を樹立した.両細胞におけるFas誘導アポトーシスの差異を検討した結果,Fas抗体架橋刺激により,SMS1細胞はSM(-)細胞に比べ,有意にFasの凝集,アポトーシスシグナルが誘導された.ラフトへのFasの移動およびラフトでのセラミド合成能は,WR/Fas-SMS1細胞で有意に増加していた.このことは細胞膜におけるスフィンゴミエリンが,ラフトの形成およびアポトーシスシグナル伝達に重要であることを示唆している.臨床的検討として,全身性エリテマトーデス患者リンパ球のラフト発現の解析を行った.SLE患者T細胞およびB細胞ではラフト発現が有意に増強していることを認めた.さらに,T細胞分画では,制御性T細胞と思われるCD25陽性分画およびメモリーT細胞であるCD45陽性分画におけるラフト発現が著明に増強していた.これらのラフト発現増強はSLE患者における異常な免疫活性化と良く相関していた.このことは,SLEにおける自己反応性リンパ球がラフト発現により同定出来る可能性があること,このラフトを制御すれば自己免疫異常を制御出来る可能性を示唆している.

This study は, systemic エ リ テ マ ト ー デ ス に お け る immune abnormalities を cells activeness シ グ ナ ル 伝 da の center で あ る cell membrane lipid raft (ラ フ ト) の surface か ら Ming ら か に す る こ と に あ る. Of basic 検 と し て, ラ フ ト の ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル に お け る importance を beg し 検 た. こ の た め に, Fas 発 now WR19L cells よ り ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン owe damage plant WR/Fas - SM (-) を establish し, I 々 が ク ロ ー ニ ン グ し た sphingomyelin synthase Gene (SMS) (J.B.C. 279:18688-18693200) を heritage 伝 son import し た ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン synthetic reply strains (WR/Fas - SMS1) を set し た. Struck cells に お け る Fas induced ア ポ ト ー シ ス の differences を beg し 検 た results, Fas antibody bridging stimulus に よ り, SMS1 は SM (-) cells に than べ, intentionally に Fas の agglutination, ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル が induced さ れ た. ラ フ ト へ の Fas の mobile お よ び ラ フ ト で の セ ラ ミ ド synthesis can は, WR/Fa S - SMS1 cells で intentionally に raised plus し て い た. こ の こ と は membrane に お け る ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン が, ラ フ ト の form お よ び ア ポ ト ー シ ス シ グ ナ ル 伝 に important で あ る こ と を in stopping し て い る. Of clinical 検 と し て, systemic エ リ テ マ ト ー デ ス patients リ ン パ ball の ラ フ ト 発 is の parsing line を っ た. SLE patients with T cell お よ び B cells で は ラ フ ト 発 now が intentionally に raised strong し て い る こ と を recognize め た. さ ら に, T cells points draw で は, T cell suppression sex と think わ れ る CD25 positive points draw お よ び メ モ リ ー で T cells あ る CD45 positive points draw に お け る ラ フ ト 発 が zhao Ming に now raised strong し て い た. こ れ ら の ラ フ ト 発 now raised strong は SLE patients に お け る abnormal immune activation な と good く phase masato し て い た. こ の こ と は, SLE に お け る anti 応 their sexual リ ン パ ball が ラ フ ト 発 now に よ り possibility with set out る が あ る こ と, こ の ラ フ ト を Control すれば one 's own immune abnormalities を control the possibility of る, を suggest て る る る.

项目成果

Expression cloning of a human cDNA restoring sphingomyelin synthesis and cell growth in sphingomyelin synthase-defective lymphoid cells

• DOI: 10.1074/jbc.m401205200
• 发表时间: 2004-04-30
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Yamaoka, S;Miyaji, M;Okazaki, T
• 通讯作者: Okazaki, T

Increase of nuclear ceramide through caspase-3-dependent regulation of the "sphingomyelin (SM) cycle" in Fas-induced apoptosis.

Fas 诱导的细胞凋亡中，通过 caspase-3 依赖性调节“鞘磷脂 (SM) 循环”增加核神经酰胺。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Cancer Res. 64
• 作者: Watanabe I;et al.
• 通讯作者: et al.

Fractalkine and vascular biology : from basic research to clinical diseases.

分形因子和血管生物学：从基础研究到临床疾病。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Arterio.Thromb.Vase.Biol.(Review). 24
• 作者: Umehara H;et al.
• 通讯作者: et al.

Anthracycline resistance in HL-60/ADR cells via transcriptional up-regulation of glucosylceramide synthase and reversal by Sp1 (GC-rich) decoy oligodeoxynucleotides.

HL-60/ADR 细胞中的蒽环类药物耐药性是通过葡萄糖神经酰胺合酶的转录上调和 Sp1（富含 GC）诱饵寡脱氧核苷酸的逆转来实现的。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Cancer Res. 64
• 作者: Uchida Y;et al.
• 通讯作者: et al.

Interleukin-2-induced survival of natural killer (NK) cells involving phosphatidylinositol-3 kinase-dependent reduction of ceramide through acid sphingomyelinase, sphingomyelin synthase, and glucosylceramide synthase

• DOI: 10.1182/blood-2004-03-0900
• 发表时间: 2004-11-15
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Taguchi, Y;Kondo, T;Okazaki, T
• 通讯作者: Okazaki, T