ストレス蛋白質の誘導と中枢神経細胞の生存

应激蛋白的诱导和中枢神经细胞的存活

• 批准号: 06672269
• 负责人: 松木 則夫
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06672269/
• 关键词: 熱ショック; 神経生存; HSP70; 培養神経

中枢神経細胞は一般に分裂する能力を持たないため、死んだ神経細胞が再生することはない。老化時やアルツハイマー病・ハンチントン舞踏病などでは神経細胞が変性・脱落し、たちまち高次神経機能は障害をもたらす。しかし、神経細胞の死を防ぐ有効な手段は未だに全く無く、神経細胞死をもたらす原因も不明である。本研究は環境を完全に制御した培養状態に神経細胞をおき、神経細胞の生存とストレス蛋白質(熱ショック蛋白質)の発現の相関を解明することを目的とした。ラット胎児脳から海馬を摘出して培養し、生存に対する熱ショック蛋白質の作用を解析した。熱ショック(42℃、30分)を与えると培養海馬神経細胞の生存が著しく高められた。この生存促進作用は、培養密度に関係なく観察されたので、神経細胞やグリア細胞に対する直接作用と考えられた。熱ショック時におけるHSP70 mRNAの変動をノーザンブロットおよびin situハイブリダイゼーションによって解析した。熱ショック後にmRNAレベルが増加していることが確認できた。HSP70に特異的な抗体を用いて蛋白質レベルの変動を検討した結果、蛋白質レベルでも誘導が確認できた。また、核に最初に発現しそれが時間経過に伴い細胞全体に広がることを明らかにした。さらにアンチセンスオリゴヌクレオチドを熱ショックと同時に添加すると、熱ショックによる生存促進作用およびHSP70蛋白質の発現が完全に抑制することを見いだし、熱ショック蛋白質と神経細胞の生存の関係を直接示すことができた。

Central nervous cells maintain the ability to divide normally and regenerate after death. Aging is a disease of the brain. It is a disease of the brain. It is a disease of the brain. There is no way to prevent the death of neurons, and the cause of the death of neurons is unknown. The aim of this study is to elucidate the correlation between the development of protein and the survival of neurons under complete environmental control. Analysis of the role of protein in the development and survival of hippocampus The survival of cultured hippocampal neurons was improved by heating (42℃,30 min). This survival promotion effect is observed in relation to culture density, and in relation to the direct effect of neurons and cells. The expression of HSP70 mRNA was analyzed in situ. After the heat treatment, the mRNA expression increased. HSP70-specific antibodies were used to detect protein activity, and protein activity was confirmed. The first time the nucleus appears, the second time the nucleus appears, the third time the nucleus appears. In addition, the survival promotion effect and the complete inhibition of HSP70 protein production were also observed. The relationship between HSP70 protein and the survival of neurons was directly demonstrated.

项目成果

H.Koike ら: "S-HTIA receptor-mediated inhibition of N-type Ca current in acutely isolated ventromedial hypotholamic neuronal cells." Neurosci.Res.19. 161-166 (1994)

H. Koike 等人：“S-HTIA 受体介导的急性分离的腹内侧下丘脑神经元细胞中 N 型 Ca 电流的抑制。Neurosci.Res.161-166 (1994)。

Y.Torii ら: "Pyrogallol,a generator of free radicals,is emetogenic in suncus murinus." Brit.J.Pharmacol.111. 431-434 (1994)

Y.Torii 等人：“连苯三酚是自由基的产生剂，在鼠尾草中具有致吐作用。”Brit.J.Pharmacol.111 (1994)。

Y.Ikegaya: "Involvement of carbon monoxide in loug-term potentiation in the dentate gyrus of anesthetized rats." Japan.J.Pharmacol.64. 225-227 (1994)

Y.Ikegaya：“一氧化碳参与麻醉大鼠齿状回的长期增强。”