权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

培養神経細胞を用いたシナプス形成とカルシウムチャネルとの関係の解析

利用培养神经元分析突触形成与钙通道之间的关系

基本信息

批准号：
03671094
负责人：
松木則夫
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03671094/
关键词：
シナプス形成カルシウムチャネル神経の可塑性神経栄養因子

项目摘要

神経細胞は細胞とシナプスを形成することにより情報を伝達する。そして、脳としての高次機能もシナプスの形成に依存している。このシナプスの形成・維持は恒常的なものではなく、記憶・学習や神経疾患時に大きく変動することが示唆され、シナプスの可塑性と呼ばれている。本研究は、培養神経細胞を用いて、数個から十個程度の細胞で簡単なネットワ-クを構築させ、その時のシナプス形成に必要な因子を特に細胞内カルシウム濃度の調節に重要なカルシウムチャネルを中心に解析することを目的とする。(1)シナプス形成の条件の検討:ラット胎児脳の各部位を培養し、シナプスを形成する条件の検討を行った。その結果、記憶に重要な役割を果たしていると考えられる海馬の培養条件として、胎児の日齢16〜18日目、培養密度は約20万cells/cm^2、ポリリジンコ-トしたカバ-グラス上に培養することが至適条件であることが明らかになった。細胞密度を上げ酵素処理を工夫することによりグリア細胞のフィ-ダ-レ-ヤ-を必要としなくなった。(2)細胞内カルシウム濃度の多点同時解析:こうして得られた培養細胞にFuraー2を負荷し、細胞内カルシウム濃度の時間的および空間的変動を記録した。培養7日目頃から多くの神経細胞で同期した細胞内カルシウム濃度の変動が記録でき、シナプスが形成されていることが明らかになった。各種の神経栄養因子を培養液に添加してみたが、短時間内での作用は認められなかった。長期作用としては、神経栄養因子の生存に対する効果との分離が今後の課題である。(3)単離細胞のカルシウム電流:生後2週齢のラット視床下部から神経細胞を単離し、カルシウムチャネル電流の解析を行った。塩基性線維芽細胞成長因子がLタイプのカルシウム電流を短期作用として増大させることが明らかになった。

The brain cells are formed from information. The higher-order functions of the system are dependent on each other. The formation and maintenance of these patterns are consistent with the changes in memory, learning, and mental health conditions. In this study, we analyzed the factors necessary for the regulation of intracellular cell concentration in cultured neurons at ten different levels. (1)A study of the conditions for the formation of the fetus: the cultivation of various parts of the fetus, the study of the conditions for the formation of the fetus The results showed that the culture conditions of hippocampus were suitable for memory, and the days of fetus were 16~18 days. The culture density was about 200,000 cells/cm^2. Cell density is the most important factor in the development of cell culture. (2)Multi-point simultaneous analysis of intracellular concentrations: the loading of Fura-2 in cultured cells, the temporal and spatial changes in intracellular concentrations were recorded After 7 days of culture, the changes of intracellular concentration of many neurons were recorded. A variety of neurotrophic factors are added to the culture medium, and the effect is recognized in a short time. The long-term effects of neurotrophic factors on the survival of human beings are discussed. (3)Cell cycle currents: The analysis of cell cycle currents in the lower part of the optic bed at 2 weeks after birth Basic cell growth factor is a short-term factor that increases cell flow and increases cell viability.