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血管新生における血管内皮細胞基底膜ヘパラン硫酸プロテオグリカンとヘパラナーゼの役割

血管内皮细胞基底膜硫酸乙酰肝素蛋白聚糖和乙酰肝素酶在血管生成中的作用

基本信息

批准号：
06836004
负责人：
中島元夫
金额：
$ 0.83万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

血管壁の基本骨格の維持と物質透過の制御に働く血管基底膜には、種々の増殖因子やサイトカインが蓄積されている。これらの因子は、タイプIVコラーゲンやラミニンとともに基底膜を構成するヘパラン硫酸プロテオグリカンの糖鎖部分またはコアペプチドに結合しており、組織の損傷や腫瘍組織における血管新生誘導などの際に遊離されて、血管内皮細胞等の正常細胞およびがん細胞の遊走と増殖を誘起する。血管内皮細胞はヘラパン硫酸プロテオグリカンを産生して基底膜を構築する一方、この基底膜の代謝回転に働く酵素としてへパラン硫酸プロテオグリカンの糖鎖を分解するヘパラナーゼを産生する。本研究では、血管新生における血管内皮ヘパラナーゼの役割について解明することを最終目標とした。今年度は、樹立したマウスの肺および肝の毛細血管内皮細胞がつくる細胞外マトリックス中の硫酸化プロテオグリカンの特性を、^<35>S-硫酸と^3H-グルコサミンで生合成標識して化学的、酵素学的に分析した。いずれの内皮細胞の産生するプロテオグリカンも、85%以上が高硫酸化型のヘパラン硫酸プロテオグリカンで、7.5%から15%のコンドロイチン4硫酸も検出された。次に、ヌードマウスにおいて肺または肝特異的転移性をしめすヒトA375メラノーマとKG-2腎がん細胞の亜株細胞を用いて、それぞれの対応する臓器由来の血管内皮細胞への接着と細胞外マトリックス硫酸化プロテオグリカンの分解誘導を解析した。その結果、肺転移性メラノーマ細胞と腎がん細胞は肺血管内皮細胞へのより選択的接着と浸潤を示し、ヘパラン硫酸プロテオグリカンの分解を著しく促進した。他方、肝転移性メラノーマ細胞は肝類洞内皮細胞に対しコンドロイチン硫酸を介する接着を示し、基底膜からはヘパラン硫酸プロテオグリカンの分解遊離が認められた。血管内皮細胞によるヘパラン硫酸プロテオグリカンの分解はメラノーマ細胞および腎がん細胞の培養上清によっても誘起された。これは中和活性を有する抗bFGF抗体により部分的に抑制され、両がん細胞ではbFGFが産生されることが免疫染色で確認された。したがって、血管内皮細胞によるヘパラン硫酸プロテオグリカン分解を誘導するがん細胞因子の一部はbFGFであることが推察され、bFGFによるヘパラナーゼの産生誘導の機構について解析を進めている。

The basic structure of the blood vessel wall is maintained, and the substance permeation is controlled by the blood vessel basement membrane and the accumulation of growth factors. Composed of これらのfactorは、タイプIVコラーゲンやラミニンとともにbasement membraneをするヘパラン sulfate プロテオグリカンのsugar lock part またはコアペプチドに combination Induction of angiogenesis in tissue damage, tumor tissue, and free movement of normal cells such as vascular endothelial cells. Vascular endothelial cells, sulfate-containing sulfate and sulfate, produce and construct basement membrane, which is the generation of basement membrane. Thanks to the enzyme としてへパラン sulfate プロテオグリカンのsugar lockを decomposes するヘパラナーゼを to produce する. The ultimate goal of this study is to explain the vascular endothelium and vascular endothelium. This year, we established the lung and liver capillary endothelial cells and extracellular sulfated membranes in the lungs and liver. Characteristics of リカンの, ^<35>S-sulfuric acid, ^3H-グルコサミンで生SYNTHETIC IDENTIFICATION, してchemical, enzymatic にANALYSIS. Endothelial cell-generated endothelial cell-derived endothelial cells, 85% or more highly sulfated type of endothelium Sulfate プロテオグリカンで, 7.5% から15% のコンドロイチン4 sulfate も検出された. Secondary に, ヌードマウスにおいてlung またはliver-specific migratory をしめすヒトA375 メラノーマとKG-2 kidney がん cells の亜 strain cells are used いて, それぞれの対応する蓓organ origin of vascular endothelial cells and への-connecting cells The outer マトリックス sulfated プロテオグリカンの decomposition induction を analysis した.そのRESULTS: Pulmonary migratory neutrophil cells, kidney vascular endothelial cells, and pulmonary vascular endothelial cells. The subsequent infiltration is shown, and the decomposition and decomposition of the sulfate sulfate is promoted. Other prescriptions, hepatic migratory migrating cells and hepatocellular cavernoid endothelial cells. Next, the basal membrane is decomposed and the basement membrane is decomposed into a sulfate-containing sulfate. Vascular Endothelial Cells Decomposition of Vascular Endothelial Cells The culture supernatant of ノーマcell およびkidney がん cells was induced by によっても. The neutralizing activity of これは has been confirmed by immunostaining of する anti-bFGF antibody and により part of にされ, and the production of bFGF in ががん cells has been confirmed by immunostaining.したがって, vascular endothelial cells によるヘパラン sulfate プロテオグリカン decomposition を-induced するがんcytokine のpartはb FGF's research and analysis, bFGF's analysis and analysis of the induction mechanism.