イトマキヒトデ初期胚におけるDNA合成開始の調節機構

早期海星胚胎DNA合成启动的调控机制

• 批准号: 06839013
• 负责人: 立花 和則
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06839013/
• 关键词: DNA複製; イトマキヒトデ; 初期胚; 受精; 蛋白質合成

本研究では、イトマキヒトデの卵成熟中の卵の中に存在する蛋白質合成に依存したDNA合成を阻害する因子(この因子をS因子と呼ぶ)について、(1)その合成される時期や半減期、さらにDNA合成開始のどの段階に作用しているかなどの基本的性質を調べる。(2)その遺伝子や蛋白質の単離を行うの2点を目標として実験を行った。(1)については、まず卵熟成過程のいろいろな時期に蛋白質合成阻害剤であるピューロマイシンを投与し、DNA合成の有無を調べた。その結果、卵核胞崩壊(GVBD)以前に蛋白質合成を阻害した場合にはDNA合成ができず、DNA合成能が出現するのはGVBDから第一極体放出までの間の時期であることが明らかとなった。この蛋白質合成を阻害することによって誘起されるDNA合成は^3H-thymidineの取り込みから、1回の完全なDNA複製を行っているか、あるいは、それより少ない量であることがわかった。さらに、ピューロマイシン処理後にいろいろな時間に投与したチミジンのアナログであるBromodeoxyuridine(BrdU)の取り込みを調べたところ、卵はDNA合成開始(ピューロマイシン処理後約2時間)から4時間以上もS期の状態にあることがわかった。通常のDNA合成には約30分しかかからないことから、蛋白質合成を阻害した場合には、卵のDNA合成は阻害はされないものの非常にゆっくりとしたものになると考えられる。(2)S因子の遺伝子のクローン化については、ショウジョウバエのplu遺伝子をプローブとしてヒトデ卵のcDNAライブラリーを検索したが、陽性のクローンは得られなかった。しかし、ヒトデ卵のDNA合成開始には蛋白質キナーゼではなく蛋白質フォスファターゼが関与していることが判明した。現在この蛋白質フォスファターゼ遺伝子に対するcDNAのクローニングを行っているところである。

In this study, there is protein synthesis in oocytes during maturation of oocytes. DNA synthesis is dependent on the inhibition of factor S (factor S). In this study, there is protein synthesis in oocytes during maturation. In this study, there are two proteins in the oocytes during maturation. (1) the first half of the cycle of synthesis, the second half of the cycle, the beginning of DNA synthesis, the first half of the cycle, the first half of the cycle. (2) the protein will be separated from the line at 2 o'clock. The main results are as follows: (1) during the process of egg maturation, protein synthesis hinders the synthesis of protein, and the synthesis of DNA has no effect on the synthesis of protein. The results of the experiment, the inhibition of protein synthesis before GVBD, the inhibition of DNA synthesis and the synthesis of DNA were able to detect the release of the first cycle of GVBD. Protein synthesis block DNA synthesis ^ 3H-thymidine synthesis, one full DNA copy, one full DNA copy, one less dose. During the last two weeks, the Bromodeoxyuridine (BrdU) was fetched and the egg DNA synthesis began (about 2 hours after the crash). It has been more than 4 hours since the start of the cycle. Usually, DNA synthesis is about 30 minutes old. Protein synthesis, protein synthesis, egg DNA synthesis, protein synthesis, egg synthesis, protein synthesis, egg synthesis, protein synthesis, protein synthesis (2) the S-factor

项目成果

Ookata,K.et al.: "Cyclin B in teraction with microtuble-associated protein^4(MAP4)far gets p34^<cdc2> kinase to microtubles and is a potential regulator of M-phasemicrotuble dynaw" Journal of Cell Biology. 128(in press). (1995)

Ookata, K. 等人：“细胞周期蛋白 B 与微管相关蛋白 ^4 (MAP4) 相互作用，远将 p34^<cdc2> 激酶引入微管，并且是 M 相微管动力的潜在调节剂”《细胞生物学杂志》。