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イトマキヒトデ卵母細胞ＭＩ停止解除時のｍＲＮＡポリＡ鎖伸長制御機構

海星卵母细胞 MI 阻滞释放后 mRNA 聚 A 链伸长的控制机制

基本信息

批准号：
13J10787
负责人：
越智洋絵
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Ochanomizu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J10787/
关键词：
mRNA ポリA鎖伸長ウリジレーション卵母細胞ヒトデ

项目摘要

哺乳類培養細胞などでは mRNAの“短いポリA鎖”の末端がU化されることが報告されており、U化は“mRNA分解の目印”と考えられている。一方卵母細胞では“短いポリA鎖”をもつmRNAが貯蔵されており、時期特異的にそのポリA鎖が伸長され翻訳が活性化する。しかし卵におけるmRNAとU化との関係は全く明らかでなかった。そこで本研究ではこれに着目し「卵細胞のｻｲｸﾘﾝB mRNAがU化されており、U化RNAは全体分解を受けずにポリA化すること」を明らかにしてきた。すなわち卵細胞のmRNA U化は“mRNA分解目印”とは異なる機能をもつ可能性があり、さらなる詳細の究明が必要だった。そこで本年度は次の２つの課題に取り組んだ。【U化ｻｲｸﾘﾝB mRNAがポリA化される現象の詳細解明】ホルモン刺激前後の卵のｻｲｸﾘﾝB mRNAの動態と配列の詳細を調べたところ「U化mRNAの3’末は数塩基の部分的な分解(トリミング)を受け、続いてポリA化が起きる」ことが明らかとなった。ただしトリミングを受けずにポリA化するものも約1/3存在しており、トリミングはポリA化の必須要素ではないと考えられる。【卵細胞mRNA U化の網羅的解析】卵成熟過程におけるU化修飾の全体像を明らかにするため、次世代ｼｰｸｴﾝｼﾝｸﾞ用のサンプル調整法の検討そしてｼｰｸｴﾝｼﾝｸﾞ解析を行った。ホルモン刺激前の卵のmRNA3'末端配列について解析したところ、U化されるmRNAは数百種類存在することが明らかとなった。本研究ではU化mRNAには“分解経路”に加え、“翻訳へ利用される経路”が存在することを証明し、さらに網羅的解析によりその全体像の一端を明らかにすることに成功した。今後は3’末端トリミングの分子機構の解明や網羅的解析を進めることで、U化修飾の全体像を明らかにし、卵母細胞U化の生理学的意義の解明に迫ることが期待される。

Mammalian cultured cell mRNA's "short いポリA lock" terminal がU change されることが report されており, U change "mRNA decomposition の目print" と考えられている. One of the oocyte "short いポリA lock" をもつmRNA が storage 蔵されており, period-specific にそのポリA lock が elongation され turn 訳が activation する.しかし EggにおけるmRNAとU化とのrelationsは全く明らかでなかった.そこでThe purpose of this studyではこれに「Egg cellのｻｲｸﾘﾝB The whole decomposition of mRNA and U-RNA is done.すなわちUmRNA of egg cells は"mRNA decomposition mark" とはdifferent なるfunction をもつpossibility があり, さらなるdetails のnecessary だった.そこでThis year's は二つのproject is taken by the group んだ. 【Detailed explanation of the phenomenon of U-changeｻｲｸﾘﾝB mRNA がポリA change される】のOVA before and after ホルモン stimulation のｻｲｸﾘﾝB The details of the dynamics and arrangement of mRNA are as follows: "The 3' end and base part of U-shaped mRNA" The な decomposition (トリミング)をReceived け、続いてポリA化が出きる」ことが明らかとなった.ただしトリミングをReceived けずにポリA化するものもAbout 1/3 existsしており, トリミングはポリA のessential element ではないと卡えられる. [Egg cell mRNA Analysis of the U-shaped snare】Egg maturation process U-shaped modification of the overall image を明らかにするため, next generationｼｰｸｴﾝｼﾝｸﾞUse the のサンプル adjustment method to analyze the を行った. There are hundreds of types of pre-stimulated egg のmRNA 3' end arrangement について analysis したところ and U-changed されるmRNA することが明らかとなった. In this study, there is a "decomposition pathway" and a "translation utilization pathway" of U-mutated mRNA.ことをproves し、The analysis of さらに snareによりそのone end of the whole image を明らかにすることにsuccessfulした. In the future, we will analyze the structure of the molecular structure of the 3' terminal molecule and proceed with the analysis and U-modification. The overall image is clear and the physiological significance of U-shaped oocytes is clear and the physiological significance is clear and the expectation is clear.