Semaphorin 3A を用いた新規直接覆髄剤の開発

使用 Semaphorin 3A 开发新型直接盖髓剂

• 批准号: 16H07058
• 负责人: 吉田 晋一郎
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-08-26 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H07058/
• 关键词: 歯髄幹細胞; 直接覆髄; Semaphorin 3A; β-catenin; 象牙芽細胞分化; 歯髄; 修復象牙質

本研究では、これまで抜髄の適応になっていた露髄症例においても歯髄組織の保存が可能な新規直接覆髄剤の開発を目的としたものである。　まず、ヒト抜去歯牙歯髄組織からsingle colony selectionにより単離した歯髄幹細胞クローンのキャラクタライゼーションを行った。分化アッセイ系（骨芽細胞誘導。脂肪細胞誘導、軟骨細胞誘導）を用いて、多分化能を有し、またフローサイトメトリック分析法により間葉系幹細胞マーカー（CD73,CD90,CD105,CD146,CD166）を発現する細胞クローンを歯髄幹細胞として実験に使用した。次に、こうして得られたヒト歯髄幹細胞をSema3A含有の象牙芽細胞分化誘導培地にて培養した。その結果、Alizarin Red S陽性の石灰化物形成が有意に促進し、象牙芽細胞関連マーカー因子の遺伝子発現が有意に上昇した。以上の結果から、Sema3Aによるヒト歯髄幹細胞の象牙芽細胞分化誘導効果が確認された。そこで申請者は、Sema3Aがヒト歯髄幹細胞の象牙芽細胞分化を誘導する細胞内シグナルとしてβ-catenin依存的経路に着目し、これまでに、ヒト歯髄幹細胞をSema3Aで刺激した結果、β-cateninの核内移行が促進されることを明らかにしている。本研究では、ヒト歯髄幹細胞をSema3Aで刺激した結果、β-cateninの核内移行を直接的に制御する低分子量GTPaseの一つであるRac1を活性化すること、またRac1のヌクレオチド交換因子（Rac GEF）として機能するFARP2の遺伝子発現が有意に上昇することを明らかにした。さらに、Wntシグナル阻害剤として知られているDickkopf1(DKK1)を象牙芽細胞分化誘導培地に添加することによって、Sema3Aによる象牙芽細胞分化誘導効果が抑制されることが明らかとなった。

In this study, it is possible that new regulations may be directly overwritten by the organization of health care organizations, which may directly overwrite the purpose of this study. Please tell me that the single colony selection has been removed from the dental tissue and that the cells have been removed. Differentiation of bone bud cell line (bone bud cell guidance). Fat cells, bone cells, bone cells, fat cells, bone cells, bone cells, fat cells, bone cells The Sema3A of ivory bud cell differentiation was used to induce the differentiation of ivory bud. The results showed that the formation of Alizarin Red S sexual calcareous compounds was intentionally promoted, and the ivory bud cells were affected by the factor of ivory bud formation. The results of the above results showed that the differentiation of ivory buds and differentiation of ivory buds were confirmed by Sema3A cells. The cellular differentiation of ivory bud leads to the pathway of the dependence of β-catenin on the expression of β-catenin, the results of Sema3A stimulation, and the promotion of β-catenin migration in the nucleus. In this study, we tested the results of Sema3A stimulation, the direct control of low molecular weight GTPase, the activation of Rac1, the activation of Rac1, and the activation of FARP2 (Rac GEF). In this study, we analyzed the results of cellular GTPase stimulation, β-GTPase intranuclear migration and β-GTPase. The cells of Dickkopf1 (DKK1) ivory buds were induced to differentiate and the cells of ivory buds were induced to differentiate into cells of ivory buds. The results showed that the differentiation of ivory buds of ivory buds was induced by the addition of cuttings, the cells of ivory buds and the cells of ivory buds of ivory bud.