歯肉増殖症歯肉におけるTNF-α変換酵素とそのインヒビターの役割

TNF-α转换酶及其抑制剂在牙龈增生中的作用

• 批准号: 22890070
• 负责人: 板垣 真奈美
• 金额: $ 1.68万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22890070/
• 关键词: 医療・福祉; 歯学; 歯周病学; 分子生物学; 免疫組織化学; 酵素

カルシウム拮抗薬剤性歯肉増殖症罹患歯肉中における、TNF-αconverting enzyme (TACE)と、その特異的インヒビターであるTIMP-3の遺伝子発現解析を分子生物学的に解明すること、またその組織内局在について免疫組織化学にて明らかにし、薬剤性歯肉増殖症におけるTACEおよびTIMP-3の関与を究明することを目的とし、本年度は以下のように研究計画を実施した。1.試料採取慢性歯周炎患者、及び歯肉増殖症患者各10名より、歯肉組織を採取した。ただし、採取した組織の大きさが十分でなく、免疫染色用の試料はまだ不足している。2.RT-PCR解析採取した歯肉組織よりtotal RNAを抽出し、逆転写酵素反応によりcDNAを合成した。TACE,TIMP-3、β-actinについて、特異的プライマーを用いてquantitative RT-PCR(qRT-PCR)を行った。comparative threshold cycles(Ct法)にて相対定量を行った。3.免疫組織学的解析パラフィン包埋された組織を5μmの厚さに薄切し、パラフィン連続切片を作成した。現在TACE及びTIHP-3の免疫組織化学を行っているが、染色の条件設定中でまだ十分な結果が得られていない。今後解析を進めていく。4.結果の統計解析現在RT-PCRの結果を解析中である。現時点では、慢性歯周炎と歯肉増殖症歯肉との比較で、TIMP-3は歯肉増殖症で有意に高く発現しており、TACEは、歯肉増殖症で高い傾向にあることを明らかにした。TIMP-3は歯肉組織の破壊をもたらす酵素の阻害という役割を有しており、歯肉増殖症で高く発現するという今回の結果は、TIMP-3による歯肉線維化の亢進が歯肉増殖症の病態であることを示唆した。また、TIMP-3はTACEとの相互作用について現在研究が進められている酵素であるため、さらにTACEのPCR解析、及び免疫組織学的解析をすすめていき、学会発表及び論文作成を行っていく予定である。

The genetic expression of TIMP-3 in the dental pulp caused by the TNF-αconverting enzyme (TACE) and its specific oncogene can be explained by molecular biology. In addition, the relationship between TACE and TIMP-3 in pharmaceutical dental hyperplasia can be clarified by immunohistochemistry in the context of tissue internal processes. This year, the following research projects were implemented. 1. The samples were taken from 10 patients with chronic periodontitis, 10 patients with dental hyperplasia and 10 patients with dental caries. The sample size of the tissue taken is very large, and the sample used for immunostaining is insufficient. 2.RT-PCR analysis of total RNA extracted from human tissues, reverse transcription of enzymes and cDNA synthesis TACE,TIMP-3, β-actin are used to detect quantitative RT-PCR(qRT-PCR). comparative threshold cycles(Ct) 3. Immunohistochemical analysis of embedded tissues was performed by thin sections of 5μm thickness and by serial sections. Now TACE and TIHP-3 immunohistochemical staining conditions were set up and the results were obtained. From now on, we will analyze the situation. 4. The results of RT-PCR are analyzed statistically. At present, TIMP-3 is intentionally high in chronic periodontitis and dental hyperplasia compared with that in chronic periodontitis and dental hyperplasia. TIMP-3 is the enzyme inhibitor for the breakdown of dental tissue. It is the result of high levels of dental hyperplasia. TIMP-3 is the inhibitor of dental hyperplasia. The interaction between TIMP-3 and TACE is currently being studied for enzyme analysis, PCR analysis of TACE, and analysis of immunohistology.