权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

個体の成長に伴う血管の形成メカニズムの解明

阐明与个体生长相关的血管形成机制

基本信息

批准号：
22K20748
负责人：
羽田優花
金额：
$ 1.83万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-08-31 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、発生期の内皮細胞を遺伝学的に標識し、これら細胞が成体の各臓器の血管形成にどの程度寄与しているかを明らかにするために、誘導性Cre/loxP系を立ち上げ、解析を行なった。内皮特異的遺伝子kdrlのプロモーター下でCreERT2及びeGFPを発現し、ubb:loxP-stop-loxP-mCherry遺伝子を有するゼブラフィッシュ胚を4-Hydroxytamoxifen（4-OHT）で処理することで、発生期（受精後3日目）の内皮細胞をmCherryで標識する方法を用いて、脳や体幹部においては全血管の7割以上をmCherryで標識することに成功した。しかし、肝臓や腸においては発生期でのラベルができなかったため、別の内皮特異的遺伝子fli1のプロモーター下でCreERT2を発現する魚を作成した。その結果、肝臓や腸においても3~7割の発生期の内皮細胞をラベルすることができた。今後、ラベル効率をさらに上昇させるとともに成魚における解析を進める。これまでに、kdrlプロモーターを用いて発生期の内皮細胞をラベルした成魚を解析した結果、脳や体幹部において発生期の内皮細胞が同効率で維持されていることを発見した。そのため、これら解析部位に関しては、発生期に形成された血管内皮細胞が自己増殖をして成体の血管を形成することが示された。この結果を踏まえ、上記魚について4OHTを短時間処理し、成魚において1細胞に由来する内皮細胞クラスターの大きさを解析することで、発生中の内皮細胞の増殖率が一様かどうかを調べることにした。さらに、各臓器の血管を形成する前駆細胞が存在するのか、また、どの程度の細胞集団が臓器血管の形成に関与するのか知るため、内皮細胞特異的プロモーター下にzebrabowコンストラクトを発現する魚を作成中である。

This year, the identification and analysis of endothelial cell genetics in development and the degree of angiogenesis between endothelial cells and adult organs were carried out. Endothelium-specific gene kdrl was successfully identified by 4-Hydroxytamoxifen (4-OHT) in endothelial cells at the development stage (3 days after fertilization). In the early stages of development, a variety of endothelium-specific genes, such as fli1 and Creert2, were produced. The results showed that there were 3~7 segments of endothelial cells in the liver and intestine. From now on, the rate of infection will increase. The results of the analysis of the endothelial cells in the development phase of the disease and the maintenance of the endothelial cells in the development phase of the disease were as follows: The analysis of vascular endothelial cells in the development stage The results showed that the growth rate of endothelial cells in adult fish was increased by 4OHT in short time. In addition, before the formation of blood vessels in various organs, the existence of cells, the degree of cell aggregation related to the formation of blood vessels in organs, the knowledge of endothelial cell-specific blood vessels, and the development of blood vessels.