表皮角化細胞様に誘導した脂肪由来幹細胞を用いた栄養障害型表皮水疱症の新規治療開発

栄養障害型表皮水疱症は、VII型コラーゲン遺伝子異常により表皮・真皮間の係留線維に異常をきたし、容易に表皮が剥離して水疱、潰瘍が多発する疾患である。根本的治療はなく、現在、皮膚のびらん、潰瘍に対して外用剤、創傷被覆材を用いるなどの対症療法のみとなる。本研究では、栄養障害型表皮水疱症に対しての新規治療法開発を目的としている。根本的治療に向けて、これまでに脂肪組織由来幹細胞を上皮基底膜構成成分であるIV型コラーゲン上で皮膚線維芽細胞と共培養し、さらに、オールトランスレチノイン酸と骨形成因子4で刺激することで、効率良く表皮角化細胞に分化誘導する方法を見出した。この表皮角化細胞様細胞 KC-ADSCは、VII型コラーゲンを発現して創傷治癒を促進すること、また、VII型コラーゲン欠損マウス皮膚に本細胞を投与したところ、表皮基底膜部にVII型コラーゲンが発現し、水疱を生じにくくなることも確認してきた。今年度は、表皮基底膜部に沈着したVII型コラーゲンが投与したKC-ADSCによって、あるいは宿主マウスの創傷治癒過程で沈着したかどうかを調べるため、細胞治療後のVII型コラーゲン欠損マウスの移植皮膚の基底膜におけるマウスおよびヒトVII型コラーゲンの発現を、コントロール群と比較した結果、他のコントロール群同様に移植皮膚辺縁でマウス由来のVII型コラーゲンの発現が見られたが、それに加えてKC-ADSC投与群ではヒトVII型コラーゲンの発現も見られた。また、投与された細胞の局在を調べるため、抗ヒト核抗体を用いて移植したVII型コラーゲン欠損マウス皮膚の核染色を実施した。KC-ADSCを投与したVII型コラーゲン欠損マウス皮膚の表皮内でヒト由来細胞が、ヒトCol7の発現が観察された部位で核染色された。この結果から、皮下注射後のKC-ADSCの表皮内への局在が確認された。KC-ADSCが表皮内に局在することで、基底膜へVII型コラーゲンを供給していることが示唆された。

栄養障害型表皮水疱症は、VII型コラーゲン遺伝子異常により表皮・真皮間の係留線維に異常をきたし、容易に表皮が剥離して水疱、潰瘍が多発する疾患である。根本的治療はなく、現在、皮膚のびらん、潰瘍に対して外用剤、創傷被覆材を用いるなどの対症療法のみとなる。本研究では、栄養障害型表皮水疱症に対しての新規治療法開発を目的としている。根本的治療に向けて、これまでに脂肪組織由来幹細胞を上皮基底膜構成成分であるIV型コラーゲン上で皮膚線維芽細胞と共培養し、さらに、オールトランスレチノイン酸と骨形成因子4で刺激することで、効率良く表皮角化細胞に分化誘導する方法を見出した。この表皮角化細胞様細胞 KC-ADSCは、VII型コラーゲンを発現して創傷治癒を促進すること、また、VII型コラーゲン欠損マウス皮膚に本細胞を投与したところ、表皮基底膜部にVII型コラーゲンが発現し、水疱を生じにくくなることも確認してきた。今年度は、表皮基底膜部に沈着したVII型コラーゲンが投与したKC-ADSCによって、あるいは宿主マウスの創傷治癒過程で沈着したかどうかを調べるため、細胞治療後のVII型コラーゲン欠損マウスの移植皮膚の基底膜におけるマウスおよびヒトVII型コラーゲンの発現を、コントロール群と比較した結果、他のコントロール群同様に移植皮膚辺縁でマウス由来のVII型コラーゲンの発現が見られたが、それに加えてKC-ADSC投与群ではヒトVII型コラーゲンの発現も見られた。また、投与された細胞の局在を調べるため、抗ヒト核抗体を用いて移植したVII型コラーゲン欠損マウス皮膚の核染色を実施した。KC-ADSCを投与したVII型コラーゲン欠損マウス皮膚の表皮内でヒト由来細胞が、ヒトCol7の発現が観察された部位で核染色された。この結果から、皮下注射後のKC-ADSCの表皮内への局在が確認された。KC-ADSCが表皮内に局在することで、基底膜へVII型コラーゲンを供給していることが示唆された。