ラットCLiPを用いた肝小葉様構造の作製および移植の実施、構造並びに機能評価

使用大鼠 CLiP 制备肝小叶样结构、实施移植以及结构和功能评估

• 批准号: 22K20945
• 负责人: 哲翁 華子
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20945/
• 关键词: 肝胆道複合化シート; CLiP; 胆道構造; シート移植; 肝不全モデルマウス; 肝胆道シート; 肝不全マウスモデル

重篤な肝疾患に対する治療法として、肝臓移植に代わる再生医療技術の開発が行われている。本研究では胆汁排泄能を有する肝細胞シートを新たに開発し、その性能ならびに移植後の胆道構造・肝機能の評価を実施した。まず、低分子化合物刺激により脱分化させたラット由来肝前駆細胞（Chemicaly induced liver progenitor; CLiP）より胆管様ネットワーク構造を有する足場組織を誘導しその上にラット肝細胞を播種することで肝胆道複合化シート（Hepato-Biliary sheet; HBS）を作成した。HBSと比較するため、胆管様ネットワーク構造を含まない肝細胞シート（Hepatocyte Sheet; HS)も作成した。HBSは免疫蛍光染色で胆道構造と肝細胞が一体となり構築されたことを確認した。また機能面では胆汁排泄能を有し、アルブミン合成能、薬物代謝能はHSと比較しを有意に高かった。作成したHBSを免疫不全マウスの肝表及び皮下に移植し構造を評価した。肝表・皮下移植共にHBS内に管腔構造を認めた。免疫染色にて管腔構造はCLiP由来の胆管構造であると確認し、その周囲にはラット由来肝細胞を認め、組織への生着を確認した。また移植後は無血管成分であるHBS内に血管成分が誘導されることを確認した。続いて免疫不全肝不全モデルマウスの肝表にHBSを移植すると、血中ラットアルブミン値がHS移植と比較し有意に高値であった。

The development of regenerative medical technology for liver transplantation and treatment of severe liver diseases This study was conducted to investigate the development and performance of liver cells with bile excretion and to evaluate the structure of biliary tract and liver function after transplantation. The dedifferentiation of liver cells stimulated by low molecular weight compounds was induced by chemically induced liver progenitor (CLiP), bile duct structure, and hepatobiliary complex sheet (HBS). HBS comparison, bile duct development, including Hepatocyte Sheet; HS HBS was identified by immunoluminescence staining for the structure of biliary tract and liver cells. The functional area of bile excretion energy is relatively high, and the synthetic energy and metabolic energy of the substance are relatively high. HBS is an immune system. Liver surface and subcutaneous transplantation are common in HBS lumen structure. Immunostaining confirmed the origin of the bile duct structure, liver cells and tissue. After transplantation, no vascular component was induced in HBS. The immune system is not fully functional, and the liver surface is not fully functional.

项目成果

ラットCLiP由来肝/胆道複合化シートの作成及び移植後の構造評価

大鼠 CLiP 来源的肝/胆复合片的制作及移植后的结构评估

• 发表时间: 2023
• 作者: Nakata Satoshi;Murai Junko;Okada Masayasu,,,,,Tateishi Kensuke;Yamashita Shinji;Eberhart Charles G;Natsumeda Manabu;中田 聡;中田 聡;哲翁華子
• 通讯作者: 哲翁華子