ラットCLiPを用いた肝小葉様構造の作製および移植の実施、構造並びに機能評価

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重篤な肝疾患に対する治療法として、肝臓移植に代わる再生医療技術の開発が行われている。本研究では胆汁排泄能を有する肝細胞シートを新たに開発し、その性能ならびに移植後の胆道構造・肝機能の評価を実施した。まず、低分子化合物刺激により脱分化させたラット由来肝前駆細胞（Chemicaly induced liver progenitor; CLiP）より胆管様ネットワーク構造を有する足場組織を誘導しその上にラット肝細胞を播種することで肝胆道複合化シート（Hepato-Biliary sheet; HBS）を作成した。HBSと比較するため、胆管様ネットワーク構造を含まない肝細胞シート（Hepatocyte Sheet; HS)も作成した。HBSは免疫蛍光染色で胆道構造と肝細胞が一体となり構築されたことを確認した。また機能面では胆汁排泄能を有し、アルブミン合成能、薬物代謝能はHSと比較しを有意に高かった。作成したHBSを免疫不全マウスの肝表及び皮下に移植し構造を評価した。肝表・皮下移植共にHBS内に管腔構造を認めた。免疫染色にて管腔構造はCLiP由来の胆管構造であると確認し、その周囲にはラット由来肝細胞を認め、組織への生着を確認した。また移植後は無血管成分であるHBS内に血管成分が誘導されることを確認した。続いて免疫不全肝不全モデルマウスの肝表にHBSを移植すると、血中ラットアルブミン値がHS移植と比較し有意に高値であった。