線虫と哺乳類精子に存在する免疫グロブリン様タンパク質を含む配偶子間融合装置の同定

秀丽隐杆线虫和哺乳动物精子中含有免疫球蛋白样蛋白的配子-配子融合装置的鉴定

• 批准号: 23870029
• 负责人: 西村 仁
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Setsunan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011-08-24 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23870029/
• 关键词: 受精; 精子; 配偶子間融合; Igドメイン; 線虫; 進化; マウス

申請者は,線虫精子上でマウスIZUMOのような免疫グロブリン(Ig)様タンパク質が真の融合因子(fusogen)と結合していると考え,オス特異的なF28D1.8遺伝子を同定した.さらにこの遺伝子の欠失(KO)変異体を調べた結果,KO雌雄同体では配偶子間融合が観察されなかった.また,Igドメイン領域をマウスIZUMOと交換したF28D1.8のキメラ遺伝子が部分的にKO線虫をレスキューしたので,F28D1.8タンパク質(CeIZUMO)がマウスIZUMO様の分子であることが示唆された.本研究の目的は,CeIZUMOと結合している分子を同定した後,その結合分子の変異体を解析することで,線虫精子上の配偶子間融合装置を同定することである.CeIZUMOは膜貫通ドメイン以外に疎水性領域をもつので,CeIZUMO自身がfusogenとして直接膜融合を引き起こす可能性も考えられた.そこで本年度は,CeIZUMOの疎水性領域を欠失したタンパク質をコードするトランスジーンを使い,KO線虫のレスキュー実験を行った.その結果,KO変異体の受精能はほとんどレスキューされなかったので,CeIZUMOの疎水性領域がこのタンパク質の機能に重要である可能性が示唆された.さらにこの結果は,CeIZUMO自身がfusogenである可能性も示唆している.一方,CeIZUMOの線虫精子における局在を明らかにする目的で,Igドメインに対応する組換えタンパク質を大腸菌で発現させ,ウサギに免疫している.しかし,現在のところ,CeIZUMOと特異的に反応する抗体は得られていない.

Applicants は, nematode sperm で マ ウ ス IZUMO の よ う な immune グ ロ ブ リ ン (Ig) others タ ン パ ク が is の fusion quality factor (fusogen) と し て い る と え, オ ス specific な F28D1. 8 heritage 伝 を son be し た. さ ら に こ の heritage 伝 の owe son lost (KO) - variant を adjustable べ た results, KO hermaphrodite で は gamete fusion between が 観 examine さ れ な か っ た. ま た, Ig ド メ イ ン field を マ ウ ス IZUMO と exchange し た F28D1. 8 の キ メ ラ heritage 伝 son が part に KO nematodes を レ ス キ ュ ー し た の で, F28D1. 8 タ ン パ ク mass (CeIZUMO) が マ ウ ス IZUMO others の molecular で あ る こ と が business さ Youdaoplaceholder0. は の purpose, this study CeIZUMO と combining し て い を る molecules with fixed し た after そ の combined with molecular の - variant を parsing す る こ と で, nematode sperm on の を between gamete fusion device with fixed す る こ と で あ る. CeIZUMO は transmembrane ド メ イ ン outside に 疎 water areas を も つ の で, CeIZUMO itself が fusoge N と し て membrane fusion を lead き directly こ す possibility も exam え ら れ た. そ こ で this year は CeIZUMO の 疎 を owe water field loss し た タ ン パ ク qualitative を コ ー ド す る ト ラ ン ス ジ ー ン を い, KO nematodes の レ ス キ ュ ー be 験 を line っ た. そ の results, KO - variant の fertilization can は ほ と ん ど レ ス キ ュ ー さ れ な か っ た の で, CeIZUMO の 疎 water areas が こ の タ ン パ ク qualitative の function に important で あ が る possibility in stopping さ れ た. さ ら に こ の results は CeIZUMO itself が fusogen で あ も る possibility in stopping し て い る. Side, CeIZUMO の nematode sperm に お け る bureau in を Ming ら か に す で る purpose, Ig ド メ イ ン に 応 seaborne す る group in え タ ン パ ク qualitative を coliform で 発 now さ せ, ウ サ ギ に immune し て い る. し か し, now の と こ ろ, CeIZUMO と specific に anti 応 す は る antibodies to ら れ て い な い.

项目成果

Identification of a mouse Izumol-like gene in C.elegans that is required for fertilization

鉴定秀丽隐杆线虫中受精所需的小鼠 Izumol 样基因

• 发表时间: 2011
• 作者: 西村仁