ヒト好中球由来抗菌タンパク質BPIを介した大腸菌上での補体系活性化機構について

人中性粒细胞源性抗菌蛋白BPI介导的大肠杆菌补体系统激活机制

• 批准号: 12780447
• 负责人: 西村 仁
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780447/
• 关键词: BPI; 好中球; 大腸菌; 補体系; 抗菌; 活性化; LBP

本年度は,以下の事項について研究を行った.(1)BPIが補体系活性化を亢進させる他の細菌の検索グラム陰性菌である大腸菌ATCC 25900株とDH5α株,およびグラム陽性菌である肺炎双球菌を用いて各種菌株上における組換えヒトBPIによる補体系活性化亢進を調べたところ,ATCC 25900株とDH5α株上ではBPIの効果が観察されたのに対して,肺炎双球菌上では補体系活性化亢進が観察されなかった.この結果より,BPIは補体系活性化亢進においてもグラム陰性菌特異的であることが示唆された.(2)補体系活性化亢進におけるBPIの機能領域の同定まずBPIのC末端領域を欠失させた変異体をHEK293細胞で産生させることを試みたが,組換えタンパク質の産生は確認できなかった.Cys-132をAlaに置換した変異体のCHO細胞における産生とその抗菌活性が報告されているので,現在,この変異体の産生を試みている.一方,グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)とBPIのC末端領域の融合タンパク質を大腸菌で産生させることに成功した.今後は,この融合タンパク質が対照のGSTと比較してBPIによる補体系活性化亢進作用に対する阻害効果をもつかどうかを検討する予定である.

は this year, the following matters の に つ い を line っ て research た. (1) the BPI が filling system activeness を hyperthyroidism さ せ る he の bacterial の 検 cable グ ラ ム negative で あ る coliform ATCC 25900 strains と DH5 alpha strains, お よ び グ ラ ム positive で あ る pneumonic diplococcus を with い て all kinds of strains に お け る group in え ヒ ト BPI に よ る filling system activeness hyperthyroidism を adjustable べ た と こ ろ, ATCC 25900 strains と DH5 alpha strains on で は BPI の unseen fruit が 観 examine さ れ た の に し seaborne て, pneumonic diplococcus on で は filling system activeness hyperthyroidism が 観 examine さ れ な か っ た. こ の results よ り, BPI は filling system activeness hyperthyroidism に お い て も グ ラ ム negative specific で あ る こ と が in stopping さ れ た. (2) fill system activeness hyperthyroidism に お け る B PI の の function field with constant ま ず BPI の C terminal areas を owe lost さ せ た - variant を で HEK293 cells produce さ せ る こ と を try み た が, set in え タ ン パ ク production の は confirm で き な か っ た. Cys - 132 を Ala に replacement し た - variant の CHO cells に お け る produce と そ の antibacterial activity report が さ れ て い る <s:1> で, now, the <s:1> <s:1> variant <e:1> produces を try みて る る る. Side, グ ル タ チ オ ン S - ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ (GST) と BPI の C terminal areas の fusion タ ン パ ク qualitative を coliform で produce さ せ る こ と に successful し た. The next は こ の fusion タ ン パ ク qualitative が polices according to の GST と compare し て BPI に よ る filling system activeness hyperthyroidism role に す seaborne る resistance against unseen fruit を も つ か ど う か を beg す 検 る designated で あ る.

项目成果

Hitoshi Nishimura: "Bactericidal/permeability-increasing protein promotes complement activation for neutrophil-mediated phagocytosis on bacterial surface"Immunology. 103(4). 519-525 (2001)

Hitoshi Nishimura：“杀菌/通透性增加蛋白促进细菌表面中性粒细胞介导的吞噬作用的补体激活”免疫学。