効果的な抗癌剤の開発を実現する低分子量G蛋白質Arf6シグナル伝達系の機能解析

低分子量G蛋白Arf6信号转导系统功能分析，实现有效抗癌药物的开发

• 批准号: 24890028
• 负责人: 本宮 綱記
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-08-31 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24890028/
• 关键词: Arf6; 腫瘍血管新生; 肝細胞増殖因子

本研究では、低分子量G蛋白質Arf6の腫瘍血管新生および癌細胞の転移・浸潤への関与ついて、これら両者の現象におけるArf6の分子機能メカニズムを解明し、Arf6シグナル伝達系を標的とした腫瘍血管新生および癌細胞の転移・浸潤の両者を阻害する新規の革新的抗癌剤の開発を目指す。B16メラノーマ細胞およびルイス肺癌細胞をマウス皮下に移植し、腫瘍の増大および腫瘍血管形成を解析したところ、血管内皮細胞特異的Arf6-KOマウスにおいて、腫瘍血管新生が抑制され、腫瘍の増大が阻害された。そこで、血管内皮細胞におけるArf6の機能を解析するために、ポリオーマmT抗原により初代血管内皮細胞を不死化し、コントロールおよびArf6-KO血管内皮細胞を用いてin vitro血管形成実験（チューブ形成実験および大動脈リングアッセイ）を行った。腫瘍血管形成は、VEGFやbFGF、HGFなどの様々な血管誘導因子によって制御されるが、Arf6-KO血管内皮細胞では、これらの血管誘導因子のうち、HGF依存的に誘導される血管形成が特異的に抑制されることを見出した。また、Arf6-KO血管内皮細胞では、コントロール細胞に比べてHGF依存的な細胞遊走が抑制されていた。さらに、血管内皮細胞において、HGF刺激によってArf6が活性化されること、およびArf6の活性化はHGF依存的な接着斑の形成に必要であることを明らかにした。ヒト腫瘍においても、HGF依存的な腫瘍血管形成は、腫瘍の増大に重要であることが示されており、腫瘍血管新生においてVEGFシグナル伝達経路を担保することが示唆されている。そのため、HGFシグナル伝達系を制御するArf6は、血管新生阻害剤の標的となり得ると考えられる。

This study aims to clarify the molecular function of Arf6 in tumor angiogenesis and cancer cell migration and invasion, and to develop novel anticancer agents that target tumor angiogenesis and inhibit cancer cell migration and invasion. B16-Ko cells can inhibit tumor angiogenesis and tumor growth by analyzing tumor growth and angiogenesis in lung cancer cells. Arf6-KO vascular endothelial cells are used in vitro angiogenesis and angiogenesis. Arf6-KO vascular endothelial cells have been shown to inhibit angiogenesis specifically by VEGF, bFGF and HGF. Arf6-KO vascular endothelial cells are more resistant to HGF-dependent cell migration than HGF-dependent cells. In addition, vascular endothelial cells are stimulated by HGF, and Arf6 activation is necessary for HGF-dependent plaque formation. VEGF and HGF are important for tumor angiogenesis and tumor growth. VEGF and HGF play an important role in tumor angiogenesis. HGF is the target of angiogenesis inhibition.

项目成果

リン脂質代謝酵素ホスホリパーゼD2は腫瘍形成を抑制する

磷脂代谢酶磷脂酶 D2 抑制肿瘤形成

• 发表时间: 2013
• 作者: Tamaki N;Asahina Y;Izumi N et al;本宮綱記
• 通讯作者: 本宮綱記

Deficiencies of the lipid-signaling enzymes phospholipase D1 and D2 alter cytoskeletal organization, macrophage phagocytosis, and cytokine-stimulated neutrophil recruitment.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0055325
• 发表时间: 2013
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Ali WH;Chen Q;Delgiorno KE;Su W;Hall JC;Hongu T;Tian H;Kanaho Y;Di Paolo G;Crawford HC;Frohman MA
• 通讯作者: Frohman MA

Molecular mechanisms of fMLP-induced superoxide generation and degranulation in mouse neutrophils

fMLP 诱导小鼠中性粒细胞超氧化物生成和脱粒的分子机制

• DOI: 10.1016/j.jbior.2012.09.001
• 发表时间: 2013
• 期刊: Adv. Biol. Reg.
• 作者: Kanaho Y.;Sato T.;Hongu T.;Funakoshi Y.
• 通讯作者: Funakoshi Y.