眼疾患モデルとしての変異マウス・アラキドン酸と血小板活性化因子の阻害

突变小鼠花生四烯酸和血小板激活因子抑制作为眼病模型

基本信息

批准号：
10557153
负责人：
相原一
金额：
$ 6.53万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

1.角膜・網膜血管新生:血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスおよび過剰発現マウスにアルカリ障害およびアルカリより弱い上皮障害モデルによって角膜血管新生を誘導する実験を行った。様々な条件で比較したが、野生型とノックアウト、過剰発現マウスの間に血管新生の有意な差を認めなかった。2.実験的ぶどう膜炎:PAF受容体ノックアウトマウスのミクログリアを用いて、PAFに対する反応を検討した。ミクログリアはPAFに対してMAPKの活性化を伴う走化性を示した。またPAFによりサイトカイン、神経栄養因子の誘導がみられたが、その反応はむしろ神経保護的に働くことが示唆された。PAF受容体ノックアウトマウス、細胞質型フォスフォリパーゼA2(cPLA2)のノックアウトマウスでブドウ膜炎モデルに適すバックグラウンド(BALB/c)に戻し交配を行う計画であったが終了しなかった。一方このマウスを用いてPAF受容体とぶどう膜炎の発症の関係を探るモデルとして、LPSを用いた実験的ぶどう膜炎を発症させたが、血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスおよび過剰発現マウスで差が見られなかった。3.網膜光障害:PAF受容体ノックアウトマウスおよび細胞質型フォスフォリパーゼA2(cPLA2)のノックアウトマウスに様々な条件で光照射をおこなった。光照射後によって野生型、PAF受容体およびcPLA2ノックアウトマウスの双方に視細胞のアポトーシスが誘導された。光照射後の後極部網膜外顆粒層のTUNEL陽性細胞の数を計測したところ、経時変化としては統計学的な有意差を認めなかった。光照射後4日以降、視細胞層はPAF受容体ノックアウトマウスで野生型に比べて有意に温存されていた。このことより、PAF受容体は傷害された視細胞の貧食処理に関与すると考えられた。一方cPLA2ノックアウトマウスに関しては野生型と視細胞の障害は差がなかった。4.網膜変性症:遺伝的網膜変性モデルマウスであるC3H(rd)とcPLA2あるいはPAF受容体のノックアウトマウスを掛け合わせる戻し交配を引き続き行う予定であったが、種々の事情により中止している。

1。角膜和视网膜新生血管形成：我们进行了一项实验，以诱导血小板激活因子（PAF）受体敲除小鼠的角膜新生血管形成，并用碱性和较弱的上皮损伤模型过表达小鼠。尽管在各种条件下进行了比较，但在野生型和敲除和过表达小鼠之间没有观察到血管生成的显着差异。 2。实验性葡萄膜炎：使用PAF受体敲除小鼠的小胶质细胞来研究对PAF的反应。小胶质细胞表现出趋化性，MAPK激活了PAF。此外，PAF显示了细胞因子和神经营养因子的诱导，表明这些反应的作用更具神经保护作用。该计划是在PAF受体基因敲除小鼠和细胞质磷脂酶A2（CPLA2）敲除小鼠中进行反向交叉，以适用于适合葡萄膜炎模型（BALB/C）的背景，但这尚未完成。另一方面，该小鼠被用来探索PAF受体和葡萄膜炎之间的关系，并开发了使用LPS的实验性葡萄膜炎，但是在血小板激活因子（PAF）受体敲除小鼠和过表达小鼠之间没有发现差异。 3。视网膜光毒剂：PAF受体基因敲除小鼠和细胞质磷脂酶A2（CPLA2）敲除小鼠在各种条件下受到光照射。野生型，PAF受体和CPLA2基因敲除小鼠诱导光肌诱导的感光细胞凋亡。当测量光照射后，在后极点颗粒外颗粒层中的Tunel阳性细胞数量时，随着时间的推移，变化中没有观察到统计学上的显着差异。光照射后4天后，与野生型相比，在PAF受体敲除小鼠中，光感受器层被显着保存。这表明PAF受体参与了受伤感光细胞的可食用食物不良的治疗。另一方面，野生型和感光细胞在CPLA2敲除小鼠中的损伤没有差异。 4。视网膜变性：我们计划继续在C3H（RD）之间进行反向交叉，C3H（RD）是遗传视网膜变性的模型，具有CPLA2或PAF受体的基因敲除小鼠，但由于各种情况，该组已停用。