犬糸状虫を媒介しない蚊の創出に向けた病原体媒介機構の分子遺伝学的解明

本研究ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目的とする。現在までに得られた一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析の結果、3カ所の表現型特異的ゲノム領域が推定された。そ こで、本申請ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を遺伝子レベルで 同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目指した。媒介株と非媒介株について特にEXON領域に着目して遺伝子の差異について解析した。表現型特異的な遺伝型が検出された箇所について分子生物学的な解析を行ったところ、これらの差異は表現型の発現に直接関与するかは不明であるが、蚊のフィラリア媒介能を判定かのうな指標になることが示唆された。一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析ではバックグランドの変異が存在するため、解析解像度を向上が望ましいことが示唆された。そこで抵抗性系統・感受性系統をそれぞれ近交化し解析精度を高めることを目指した。蚊は近交度を高めるとコロニーが途絶えることが多いことが大きな問題となる。2022年度1年間を用い両表現型ともに七世代以上の近交化され繁殖可能なコロニー樹立に成功した、今後ゲノム解析に共する予定である。表現型責任遺伝子解析のためex vivoでのノックダウン実験系の確立を行った。ex vivoでRNAi実験系とフィラリアの分化を解析する実験系の確立に成功した。機能減衰型の実験で表現型について重要な機能を持つ遺伝子の推定を進めている。

本研究ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目的とする。現在までに得られた一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析の結果、3カ所の表現型特異的ゲノム領域が推定された。そ こで、本申請ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を遺伝子レベルで 同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目指した。媒介株と非媒介株について特にEXON領域に着目して遺伝子の差異について解析した。表現型特異的な遺伝型が検出された箇所について分子生物学的な解析を行ったところ、これらの差異は表現型の発現に直接関与するかは不明であるが、蚊のフィラリア媒介能を判定かのうな指標になることが示唆された。一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析ではバックグランドの変異が存在するため、解析解像度を向上が望ましいことが示唆された。そこで抵抗性系統・感受性系統をそれぞれ近交化し解析精度を高めることを目指した。蚊は近交度を高めるとコロニーが途絶えることが多いことが大きな問題となる。2022年度1年間を用い両表現型ともに七世代以上の近交化され繁殖可能なコロニー樹立に成功した、今後ゲノム解析に共する予定である。表現型責任遺伝子解析のためex vivoでのノックダウン実験系の確立を行った。ex vivoでRNAi実験系とフィラリアの分化を解析する実験系の確立に成功した。機能減衰型の実験で表現型について重要な機能を持つ遺伝子の推定を進めている。