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フィラリアを媒介しない蚊作出に向けたタイ王国における犬糸状虫の生態疫学調査

泰王国犬心丝虫生态流行病学调查，以产生不传播心丝虫的蚊子

基本信息

批准号：
19KK0175
负责人：
福本晋也
金额：
$ 11.73万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-10-07 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19KK0175/
关键词：
犬糸状虫ヤブカベクター

项目摘要

本研究計画では対フィールドサンプルの解析により、フィラリアを媒介しない蚊の作出を目指し研究を行う。2021年度までの研究においてタイフィールドサンプルのネッタイシマカから遺伝学的手法を用いて、犬糸状虫を媒介する系統と媒介しない系統を分離する方法の確立に成功した。またこれらの系統をゲノムレベルで比較するため次世代シーケンサーを用いたGRAS-Di解析を行ったが、フィールド由来サンプルを用いたことによる遺伝的多様性のためにマスクされ、犬糸状虫感染性に対する表現型に対し有意な差異検出することはできなかった。そこでこの遺伝的バックグラウンドの多様性に起因するマスクの問題を解決するため、媒介系統・非媒介系統を兄妹交配することで、犬糸状虫媒介性・非媒介性ネッタイシマカ近交系の樹立を試みた。5-7世代の近郊化を行い、繁殖性と感染表現型の評価を行った。その結果、これらの近交系系統は正常な繁殖能力を維持していること、犬糸状虫に対する感染表現型を正しく遺伝していることが確認された。双方の表現型の蚊を交配し、F1・F2世代の感染表現型を個体レベルで解析後、個体毎にDNAを抽出、プールした。ある程度近交係数をたかめた媒介性・非媒介性のそれぞれの群についてGRAS-Di解析を行った。その結果前回の解析として有意な変異を持つゲノム領域が検出された。現在QTL-Seq解析も併せて行うことで責任ゲノム領域の推定を進めている。新型コロナウイルス感染症の影響により頓挫していたタイでの現地調査を再開することに成功した。現地協力研究者とともにタイ王国チェンマイ地方で約400検体のヤブカ幼虫を採集、DNAを抽出保存した。GRAS-DI・QTL-Seq解析の結果をもとにフィールド蚊のジェノタイピングを今後行う予定である。

This research plan is to analyze the relationship between the two groups and make a study on the relationship between them. In 2021, we successfully established the method of isolation of canine vector system and vector system by using the method of molecular biology. For example, if you want to compare the two types of insects, you can use GRAS-Di analysis to analyze the diversity of insects. To solve the problem of the diversity of the vector, vector and non-vector systems, sib mating, and establishment of canine vector and non-vector inbred lines. 5-7 The phenotypes of reproductive and infectious diseases were evaluated. As a result, the inbred line system maintained normal reproductive capacity, and the infection phenotype of the canine parasite was confirmed. The phenotypes of both sexes were mated, the infection phenotypes of F1 and F2 generations were analyzed individually, and the DNA of each individual was extracted. The degree of inbreeding coefficient is determined by vector and non-vector analysis. The analysis of the previous results is intentionally different from that of the previous results. Now QTL-Seq analysis is performed and responsibility is assumed. The impact of new infections has been successfully investigated in the field About 400 samples of larvae were collected and DNA was extracted for preservation. GRAS-DI·QTL-Seq analysis of the results of the next step to determine