Control of competency of pathogen vector mosquitoes by microbe-mediated paratransgenesis

通过微生物介导的副转基因控制病原体媒介蚊子的能力

基本信息

批准号：
22H02862
负责人：
嘉糠洋陸
金额：
$ 11.23万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

病原体媒介蚊におけるパラトランスジェネシスの標的として、vDNAに注目した。蚊媒介性のウイルスは、総じてssRNA(+)をゲノムとし、増殖にDNAを必要としない。しかし近年、節足動物体内において、ウイルスゲノムを鋳型としたDNA（vDNA）の産生が報告された。vDNAは、ヤブカにおけるアルボウイルスの持続感染を制御する免疫調節因子として機能する。第三者微生物により、vDNAの産生に介入することで、蚊のアルボウイルス媒介能を変化させられる可能性がある。アルボウイルスの一種である黄熱ウイルスについて、vDNA産生能力を検証する目的で、ヤブカ細胞（C6/36細胞）に黄熱ウイルス（17D-204株）を感染させ、感染細胞から抽出したDNAをテンプレートに用いてLAMP法を実施した。LAMP法のプライマーは、ワクチン株を含めた報告済みの黄熱ウイルスゲノム配列を広く認識するように設計した。その結果、ゲノム中の複数の部位から黄熱ウイルスvDNAが産生され、その検出程度に差が生じた。このvDNAを指標に、細胞内共生細菌のボルバキアなどのパラトランスジェネシス機能を評価できることが期待される。

我们专注于VDNA，作为病原体媒介蚊子副统治的靶标。蚊子传播的病毒通常使用ssRNA（+）作为其基因组，并且不需要DNA才能生长。但是，近年来，在节肢动物中报道了使用病毒基因组作为模板的DNA（VDNA）的产生。 VDNA充当一种免疫调节剂，可控制糖疗中弧菌病毒的持续感染。第三方微生物可以通过介入VDNA生产来改变蚊子的arbovirus传播能力。为了验证arbovirus的VDNA生产能力，用黄热病病毒（菌株17d-204）感染了Yabuka细胞（C6/36细胞），并使用从感染细胞中提取的DNA作为模板进行了灯。设计灯法的引物旨在广泛识别包括疫苗菌株在内的黄热病病毒基因组序列。结果，从基因组中的多个位点产生了黄热病病毒vDNA，并且检测程度不同。可以预期，该VDNA可以用作评估副神经函数（例如沃尔巴奇（Wolbachia）），例如细胞内共生细菌。

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Surveillance of Getah virus in mosquitoes and racehorses from 2016 to 2019 at a training center in Ibaraki Prefecture, Japan, a site of several previous Getah virus outbreaks

DOI：
10.1007/s00705-022-05631-3
发表时间：
2023-01
期刊：
Archives of Virology
影响因子：
2.7
作者：
A. Ochi;H. Bannai;Hiroka Aonuma;H. Kanuka;Eri Uchida-Fujii;Yuta Kinoshita;M. Ohta;Yoshinori Kambayashi;K. Tsujimura;T. Ueno;M. Nemoto
通讯作者：
A. Ochi;H. Bannai;Hiroka Aonuma;H. Kanuka;Eri Uchida-Fujii;Yuta Kinoshita;M. Ohta;Yoshinori Kambayashi;K. Tsujimura;T. Ueno;M. Nemoto

共生細菌ボルバキアによるウイルスRNAの操作

共生细菌沃尔巴克氏体对病毒 RNA 的操作