細胞外RNAによる抗転移細胞活性化の解明

阐明细胞外 RNA 的抗转移细胞激活作用

• 批准号: 22H02900
• 负责人: 中村 佐千枝
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02900/
• 关键词: 癌転移; 抗転移細胞; 細胞外RNA; 転移前ソイル; RNA結合タンパク質; がん転移抑制

がんの転移はがん側の要因と転移を受ける宿主側の要因が複雑に影響して成立する。がん原発巣が転移予定地、すなわち転移前ソイルを宿主側の臓器に作ること、そこに転移を抑制しうる少数の抗転移免疫細胞が存在することを申請者らは明らかにしてきた。この抗転移細胞は、細胞表面に局在するRNA結合タンパク質ZC3H12Dを介し、転移前ソイルから放出される細胞外mRNAにより直接活性化される。本研究では抗転移細胞の解析を、RNAに焦点を絞って解析を行うことでさらに発展させる。本年度は、受容体とリガンドの両方の解析をスタートさせた。抗転移細胞のZC3H12D受容体は、原発のがんの影響により、発現の安定性が減弱することが判明し、安定的に発現するための微小環境因子の探索と、その候補因子の調節により安定化を維持できるかどうかの研究を行った。抗転移細胞は、担癌マウスの肝臓で教育され、転移前の肺において活性化するため、担癌マウスの肝臓から抗転移細胞を採取し、受容体の発現調節に関係する転写因子を同定した。詳細は、原発がんの進行とともに上昇する転写因子群を、ノックダウンして機能スクリーニングし、１つの転写因子の影響で、ZC3H12D受容体の発現が格段に上昇して、抗転移活性を維持することが可能な知見を得た。この知見に関しては論文に報告した。一方のリガンドの候補RNAの検索を行った。最終的にはヒトの抗転移細胞の活性化に繋げることを想定し、肺の血管内皮細胞の上清を用いて、ZC3H12Dタンパク質に結合するRNAを解析することを試みた。現在複数の候補核酸が得られ、機能解析を始めたところである。特に転移抑制に関与する表現型の１つである遊走活性を用いて、ポジティブな結果を得ている。

癌症转移是通过与癌症相关因素与宿主相关因素之间的复杂影响实现的。申请人透露，原发性癌症灶将在安排转移的部位，即宿主器官中的前端土壤，即前端土壤，并且有少数可以抑制转移的抗转移性免疫细胞。抗转移细胞通过细胞表面 - 定位的RNA结合蛋白ZC3H12D直接通过从转移性土壤释放的细胞外mRNA直接激活。这项研究进一步通过关注RNA来开发抗转移细胞的分析。今年，我们开始分析受体和配体。发现由于原发性癌症的影响，降低了ZC3H12D受体在抗转移细胞中的表达稳定性，我们研究了是否可以通过调节候选因素来维持稳定表达的微环境因子以及是否可以保持稳定。在转移前在肿瘤小鼠的肝脏中教育抗转移性细胞，并在肺部激活，因此从肿瘤小鼠的肝脏中收集抗转移性细胞，并鉴定了涉及受体表达调控的转录因子。有关详细信息，我们击倒并筛选了随着原发性癌症进展而增加的转录因子的功能组，发现ZC3H12D受体的表达可以显着增加，这是由于一个转录因子的影响，从而使其能够维持抗转移活性。该发现在论文中报道了。搜索了其中一种配体的候选RNA。最终，我们试图使用肺血管内皮细胞上清液分析RNA与ZC3H12D蛋白结合，假设这将导致人类抗中转移细胞的激活。目前，已经获得了多种候选核酸，并且已经开始了功能分析。特别是使用迁移活性获得了积极的结果，其中一种参与转移抑制的表型。