難治性血管炎の単一細胞解析による不均一性の解明とRNA誘導型組織修復法の開発

通过单细胞分析阐明难治性血管炎的异质性并开发 RNA 引导的组织修复方法

• 批准号: 22H03040
• 负责人: 王 英正
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03040/
• 关键词: 難治性血管炎; 単一細胞解析; CRISPR/dCas9; 川崎病; マイクロRNA; Crispr-dCas9; 川崎病血管炎; マイクロRNA療法; マクロファージ

川崎病モデルマウスをday-0, 7, 14, 28日目にかけて、心臓内におけるCD45陽性細胞ならびにCD45陰性細胞にわけてsmall RNA sequencingを行った。また、収集したCD45陽性細胞を用いた二次元のt-SNE解析では、マクロファージ(8 clusters)、好中球（3 clusters）、T細胞(5 clusters）、B細胞(2 clusters)、natural killer細胞(1 cluster)、樹状細胞(3 clusters)、リンパ球(1 cluster)、また、CD45陰性細胞集団より、線維芽細胞(3 clusters)、血管内皮細胞(4 clusters)、平滑筋細胞(2 clusters)を同定した。川崎病血管炎モデルにおける炎症7日目での好中球発現プロファイルでは、既報のIL1alpha/beta、Mmp8の発現上昇とともに、Cxcl2, Cxcl3, Cxcl10がIL6やTnf-alphaの産生に寄与し、さらに、IFN-gamma誘導性guanylate-binding proteinsの発現上昇をはじめ、Neutrophilic granule proteinやMapkなどのカスケードを活性化させ、心筋組織の繊維化工程に誘導することを明らかにした。一方、マクロファージclusterでは、炎症後14日目にCcl6, Ccl7, Ccl8, Ccl24の発現上昇を認め、また、T細胞clusterでは、Th17サイトカインがcluster 2, 4に高発現し、Cd4, Tnfsf11を介してT細胞の活性化させ、炎症後21日目には制御性T細胞が主体となり、IL-2, IL3, IL23などの発現に伴い、炎症を収束させる代償性免疫応答機構のプログラムが活性化された。

Kawasaki disease モ デ ル マ ウ ス を day 0, 7, 14, 28 eyes に か け て is crucial, the heart inside に お け る CD45 positive cells な ら び に CD45 negative cell に わ け て small RNA sequencing を line っ た. Youdaoplaceholder0, collect た たCD45 positive cells を use the <s:1> た 2d <s:1> t-sne to analyze で ロファ, ロファ ロファ ロファ ジ ジ ジ(8 clusters), good cells (3 clusters), t cells (5 clusters), B cells (2 clusters), and natural killer cells (1) cluster), dendritic cells (3 clusters), リ パ パ globules (1 cluster), また, CD45-negative cell clusters よ, linear germ cells (3 clusters), vascular endothelial cells (4 clusters), smooth tendon cells (2 clusters)を and た た. Kawasaki disease vasculitis モ デ ル に お け る inflammation 7 orders で の 発 now in good プ ロ フ ァ イ ル で は, both reported の IL1alpha/beta, Mmp8 の 発 now rising と と も に, Cxcl2, Cxcl3, Cxcl10がIL6やTnf-alpha <s:1> generates に and <s:1>, さらに, IFN- gamma-induced guanylate binding proteins exhibit an increase in を じめ じめ, Neutrophilic granule Protein や Mapk な ど の カ ス ケ ー ド を activeness さ せ, heart muscle tissue の 繊 dimensions engineering に induced す る こ と を Ming ら か に し た. Party, マ ク ロ フ ァ ー ジ cluster で は, eye inflammation after 14 に Ccl6, Ccl7, Ccl8, Ccl24 の 発 now rising を confess め, ま た, T cell cluster で は, Th17 サ イ ト カ イ ン が cluster 2, and 4 high に 発 し, Cd4 now, Tnfsf11 を interface し て t-cell の activeness さ せ, inflammation after 21 eyes に は royal sex t-cell が principal と な り, IL - 2, IL3, IL23 な ど の 発 に now with い, inflammation を 収 beam さ せ compensatory immune る 応 answer institutions の プ ロ グ ラ ム が activeness さ れ た.

项目成果

小児心疾患と再生医療

小儿心脏病与再生医学

• 发表时间: 2023
• 作者: 平井健太;王英正
• 通讯作者: 王英正