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活性酸素増産性の環境化学物質の検出と突然変異生成機構の解明

检测增加活性氧产生的环境化学物质并阐明突变产生机制

基本信息

批准号：
04202231
负责人：
米井脩治
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04202231/
关键词：
環境化学物質活性酸素 mutM変異株遺伝子発現 sodA-lacZ nfo-lacZ oxyR soxRS

项目摘要

環境中には、細胞内の酸化還元系に組み込まれて活性酸素を産生する群の化学物質が存編する。これらの化学物質あるいは産生してくる活性酸素は、エームステストでは弱い変育原性しか示さないが、活性酸素がヒトに突然変異を起こし、また、発癌性を示すことは電離放射線を例にとれば明らかである。したがって、環境中の化学物質の中から、どの物質が、どの程度に活性酸素を産生するのかを知ることは、それらのリスクを評価する上でもきわめて重要である。本研究では、主に大腸菌を用いてその同定システムの確立に取り組み、次のような成果を得た。(1)大腸菌のmutM株は、特異的にGC-TAトランスバージョンを高頻度で起こすが、その原因はDNAに生じる酸化的損傷=8-ヒドロキシグアニンの修復欠損であると考えてよい、。X線、過酸化水素などの酸化的ストレスが誘発する突然変異でもmitM変異の影響は強く現れることが分かった。(2)大腸菌に低濃度の過酸化水素やスーパーオキサイド増産剤を与えると、それぞれ別の一群の磯伝子の発現が誘導される。sodAやnfo違伝子と、あるいはkatGとlacZとの融合違伝子を作製作て、活性酸素によるβ-ガラクトシダーゼの活性を測定すると、活性酸素によるそれぞれの違伝子の発現誘導を定量化できる。例えば、5μg/ml程度の微量のメチルビオロゲンでnfo-lacZの発現は有意に増大するこどが分かった。浅3)過酸化水素などのパーオキサイドストレスとスーパーオキサイドストレスではまったく別のシステムで別々の違伝子発現の誘導が起こるが、前者のうち8種類、後者では約9種類のものはそれぞれoxyR、soxRS違伝子によって正の調節を受けている。したがって、大腸菌のoxyR/soxRS欠損株はその支配下の違伝子の発現誘導が無いためきわめて酸化的ストレスに感受性が高くなることも明らかになった。

A group of chemical substances that contribute to the production of active acids in the environment and in the cellular acidification system. The chemical substance produced by the reaction is weak in fertility, and the active acid is suddenly different in activity and carcinogenicity. The chemical substances in the environment are important for the production of active acids. The results of this study were as follows: (1) The main purpose of this study was to establish a system for the identification of E. coli and to establish a system for the identification of E. coli. (1)The mutM strain of E. coli has a high frequency of specific GC-TA transmission. This is due to the lack of repair damage caused by acidification of DNA =8-deoxyriboflavin. X-ray, ultra-acidic water element, acid, acid, acid (2)Escherichia coli low concentrations of peracidified water and other substances are produced in different ways. The production of fusion molecules, the determination of the activity of active acids, the quantification of the induction of fusion molecules, and the identification of the expression of active acids are discussed. For example, trace amounts of nfo-lacZ at levels of 5μg/ml are intentionally increased. 3) The induction of the occurrence of the violation of the law in the case of peracidified water elements, 8 kinds of the former and 9 kinds of the latter, is regulated by the regulation of the violation of the law in the case of oxyR and soxRS. The oxyR/soxRS of E. coli is not damaged by bacteria. It is not easy to induce the development of bacteria under the control of bacteria.