活性酸素を産生する環境要因の同定とその防御に関する研究

产生活性氧的环境因素识别及防护研究

• 批准号: 06271236
• 负责人: 米井 脩治
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06271236/
• 关键词: 活性酸素; トランスバ-ジョン; mutator; 環境変異原; 突然変異; 遺伝子発現

申請者らはこれまでに活性酸素の致死作用にきわめて高感受性であるいくつかの大腸菌株を分離することを試みてきた。本研究では、活性酸素防御に関与している遺伝子を欠損させた変異株を分離した。具体的には、sodA、sodB、soi-10の三重欠損株を作成したが、自然突然変異頻度が野性株に比べて約500倍に増大しており、さらに、スーパーオキサイド増産剤および過酸化水素産生性の化学物質の致死作用に高感受性を示した。しかし、紫外線には効果がなかった。大腸菌では、スーパーオキサイドや過酸化水素で誘導される遺伝子が存在する。この応答の1つの特徴はきわめて微量(致死効果の現われる濃度の数100倍低い)で誘導されることである。申請者らが分離したsoi遺伝子のうちsoi-7あるいはsoi-10とlacZとの融合遺伝子は特に活性酸素に鋭敏に応答するので(しかもbasal levelが低い)、この系を用いて4-nitroquinoline-1-oxideのような化学物質の産生する活性酸素を検出することができた。さらに、CC103株はGC-CGトランスバ-ジョンが誘発されるとLac+に復帰する。この株から、パピ-ラ形成法で、復帰突然変異すなわちGC-CGの頻度が特異的に増大するmutatorを分離することができた。

The applicant has a high susceptibility to the lethal effect of active acids and isolates Escherichia coli strains. In this study, the active acid defense is related to the isolation of the mutant plants. Specifically, the frequency of natural mutation of the triple deficient plants of sodA, sodB and soi-10 is about 500 times higher than that of wild plants, and the sensitivity to lethal effects of hyperacidified water-producing chemicals is high.しかし、紫外线には効果がなかった。E. coli can be induced by hyperacidified water. The characteristic of this reaction is trace (the concentration of lethal effect is 100 times lower). Applicants have isolated soi-7, soi-10, lacZ and fused soi-10. CC103 strain was induced by GC-CG and Lac+. The frequency of this mutation is increased.

项目成果

TAKEMOTO,T.,Q.M.ZHANG and S.YONEI: "Isolation and characterization of new soi genes inducible by superoxide radicals in Escherichia coli K12" Frontiers of Reactive Oxygen Species in Biology and Medicine Elesevier,Amsterdam. 279-289 (1994)

TAKEMOTO,T.,Q.M.ZHANG 和 S.YONEI：“大肠杆菌 K12 中超氧自由基诱导的新 soi 基因的分离和表征”生物和医学活性氧物种前沿 Elesevier，阿姆斯特丹。

ZHANG,Q.M.,T.TAKEMOTO and S.YONEI: "The sensitivity of three soi mutants of Escherichia coli to oxidizing mutagens" Environ.Mutagen Res.Comm.16. 407-412 (1995)

张，Q.M.，T.TAKEMOTO 和 S.YONEI：“大肠杆菌的三种 soi 突变体对氧化诱变剂的敏感性”Environ.Mutagen Res.Comm.16。

YONEI,S.,Q.M.ZHANG and T.TAKEMOTO: "Isolation and characterization of Escherichia coli strains containing new gene fusions indu cible by supero xide stress" Frontiers of Reactive Oxygen Species Biology and Medicine Elesevier,Amsterdam. 277-278 (1994)

YONEI,S.、Q.M.ZHANG 和 T.TAKEMOTO：“含有超氧化物应激诱导的新基因融合的大肠杆菌菌株的分离和表征”活性氧物种生物学和医学前沿 Elesevier，阿姆斯特丹。

米井脩治、張秋梅、竹本忠司、: "細胞工学別冊「活性酸素実験プロトコール」(谷口直之編)" 秀潤社、東京, 336 (1994)

Shuji Yonei、Qiumai 张、Tadashi Takemoto：“细胞工程特卷‘活性氧实验方案’（由 Naoyuki Taniguchi 编辑），Shujunsha，东京，336（1994）