特異な塩基対形成能を持つヌクレオシドの研究

具有独特碱基配对能力的核苷研究

• 批准号: 04226209
• 负责人: 根岸 和雄
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04226209/
• 关键词: N^4-アミノシトシン; トランジション; 熱融解; 互変異性; ヒドロキシルアミノプリン; オリゴヌクレオチド; ヒドラジン; 亜硫酸

変異原性塩基アナログ、N^4-アミノシトシンがどのようにグアニンともアデニンとも塩基対を形成できるか知るために、その二本鎖形成能について検討した。まず、シトシンをただ一つ含む9-mer,5'-TAGGCGGTA-3'を亜硫酸-ヒドラジン混液で処理し、シトシンが特異的に反応してアミノシトシン(C^<am>)に喬化したオリゴヌクレオチド5'-TAGGC^<am>GGTA-3'に変換し、HPLCで精製した。その一部をとり、N^4-アミノシトシンに特異的な誘導体化後、酵素消化して調べたところ、A:T:G:アミノシトシンが2:2:4:1と予想どうりの結果となった。従って、この条件で5'-TAGGC^<am>GGTA-3'が合成できているることがわかった。この9-merと相補的でC^<am>の相手にGあるいはAが位置する2種のオリゴヌクレオチド5'-TACCGCCTA-3'および5'-TACCACCTA-3'を合成し、それぞれをアニールして2種のduplexを得た。これらC^<am>をふくむduplexと対応する通常塩基のみを含むduplexの熱融解の実験から、塩基対の安定性はC-G>C^<am>-A>C-Aと推定され、アミノdCTPの取り込みの実験と良く一致した。また、異常塩基を含むオリゴヌクレオチドを直接、酵母に作用してクロモソームDNA中に異常塩基を導入することを試みた。まず、変異原性ヌクレオシドアナログ、6-ヒドロキシルアミノプリンをクロモソームDNA中に導入し、生じた変異を分析した。その結果6-ヒドロキシルアミノプリンは主にアデニンとして振る舞うが、グアニンとしても振る舞って、ATからCGへの変異を引き起こすことが示された。この方法を利用してその他の修飾塩基の塩基対形成能についても現在解析を進めている、

The formation of heterogenic base pairs, N^4-allogeneic base pairs and heterogeneic base pairs can be investigated. A mixture of 9-mer, 5'-<am>TAGGCGGTA<am>-3 'and sulfuric acid was prepared and purified by HPLC. A:T: A:G: A: A:従って、この条件で5'-TAGGC^<am>GGTA-3'が合成できているることがわかった。The 9-mer complement C^phase <am>G ^ C^-A&gt;C <am>^ -A&gt; C^<am>-A&gt; In addition, the abnormal gene can be introduced into the DNA directly or by yeast. Analysis of the genetic diversity of DNA in the introduction of DNA and DNA in the development of genetic diversity. The results of the 6-D conversion are as follows: 1. The main conversion is as follows: 2. This method uses other modification methods to form the basis for the analysis of the current situation.

项目成果

S.Kuwazuru,K.Negishi,S.Uesugi and H.Hayatsu: "Synthesis and properties of olibonucleotides containing a mutagenic base, N^4-aminocytosine" Nucleic Acids Sympodium Series No.27. 117-118 (1992)

S.Kuwazuru、K.Negishi、S.Uesugi 和 H.Hayatsu：“含有诱变碱基 N^4-氨基胞嘧啶的寡糖核苷酸的合成和特性”核酸研讨会系列第 27 号。

T.Bessho,N.Nitta,K.Negishi and H.Hayatsu: "Blocdage of polymerase-catalyzed DNA cha in elongation by chemically modified cytosine residuse in templates and the release of blokage for readthrough" Nucleic Acids Research. 20. 4213-4220 (1992)

T.Bessho、N.Nitta、K.Negishi 和 H.Hayatsu：“通过模板中化学修饰的胞嘧啶残基来阻断聚合酶催化的 DNA cha 延伸，并释放 blokage 以供通读”《核酸研究》。