特異な塩基対形成能を持つスクレオシドの研究

具有独特碱基配对能力的screoside的研究

• 批准号: 05210207
• 负责人: 根岸 和雄
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05210207/
• 关键词: 塩基対形成; 突然変異; N^4アミノシトシン; オリゴヌクレオチド; トランスフォーメーション; 酵母; 5-ブロモウラシル; N^6-ヒドロキシアデニン

1.グアニンばかりでなくアデニンとも塩基対を形成できる異常な塩基対形成能を持つ変異原性塩基であるN^4-アミノシトシン(C^<am>)を含むオリゴヌクレオチドを合成し、その異常な塩基対形成のメカニズムの解明を試みた。C^<am>-A塩基対を含む二重鎖オリゴヌクレオチドとして、5'-GGTGC^<am>GGAG-3'/3'-CCACACCTC-5'を合成し、NMRによる解析を行なった。その結果、このオリゴヌクレオチドでは、はっきりとした塩基対形成を示唆するシグナルは得られなかった。このことから、C^<am>-A塩基対はかなり揺らぎの大きい複雑な構造を取っていることが示唆された。2.酵母細胞のクロモソーム上でのヌクレオシド類似体の塩基対形成能を知るため、オリゴヌクレオチドを酵母細胞に直接作用させて形質転換させる方法を開発した。この方法を用いて、5-ブロモウラシルとN^6-ヒドロキシアデニンがクロモソーム上でどう読まれるを検討した。その結果5-ブロモウラシルはチミンとしてのみ読まれるが、N^6-ヒドロキシアデニンはアデニンとして読まれるばかりでなく、グアニンとしても読まれることが解かった。この方法を利用して脱塩基部位の変異誘導について現在検討を進めている。

1. グ ア ニ ン ば か り で な く ア デ ニ ン と も salt formed を seaborne で き る abnormal な salt base can form を seaborne hold つ - the original difference salt base で あ る N ^ 4 - ア ミ ノ シ ト シ ン (C ^ < am >) contains を む オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を synthetic し, そ の abnormal な salt base forming seaborne の メ カ ニ ズ ム の interpret を try み た. C ^ < am > - A salt base contains を む seaborne double lock オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド と し て, 5 '- GGTGC ^ < am > GGAG - 3'/' - CCACACCTC - 5 '3 を synthetic し, NMR に よ る parsing line を な っ た. そ の results, こ の オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド で は, は っ き り と し た salt base moral formation を sucking す る シ グ ナ ル は must ら れ な か っ た. こ の こ と か ら, C ^ < am > - A salt base は seaborne か な り 揺 ら ぎ の big き い complex 雑 な tectonic を take っ て い る こ と が in stopping さ れ た. 2. Yeast cells の ク ロ モ ソ ー ム on で の ヌ ク レ オ シ ド similar body の salt base form can know を る seaborne た め, オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ド を yeast cells に direct action さ せ て form quality planning in さ せ る method を open 発 し た. こ の way を with い て, 5 - ブ ロ モ ウ ラ シ ル と N ^ 6 - ヒ ド ロ キ シ ア デ ニ ン が ク ロ モ ソ ー ム on で ど う 読 ま れ る を beg し 検 た. そ の results 5 - ブ ロ モ ウ ラ シ ル は チ ミ ン と し て の み 読 ま れ る が, N ^ 6 - ヒ ド ロ キ シ ア デ ニ ン は ア デ ニ ン と し て 読 ま れ る ば か り で な く, グ ア ニ ン と し て も 読 ま れ る こ と が solution か っ た. The <s:1> method を utilizes the <s:1> variation of the deionized base of the て to induce に を て て て now 検 discusses を into めて る る る.

项目成果

Vladimir Noskov: "Mutagenicity of 5-bromouracil and N^6-hydroxyadenine studied by yeast oligonucleotide transformation assay" Mutation Research. (in press). (1994)

Vladimir Noskov：“通过酵母寡核苷酸转化测定研究 5-溴尿嘧啶和 N^6-羟基腺嘌呤的致突变性”突变研究。

Kazuo Negishi: "The fluorescence property of dinucleoside monophosphates containing ethenoadenosine and 5,6-dihydrouridine derivatives" Nucleosides and Nucleotides. (in press). (1994)

Kazuo Negishi：“含有乙烯腺苷和 5,6-二氢尿苷衍生物的二核苷一磷酸的荧光特性”核苷和核苷酸。