トランスジェニックマウスを用いた,発がん物質による遺伝子損傷とその抑制の解析

转基因小鼠分析致癌物引起的遗传损伤及其抑制

• 批准号: 09253237
• 负责人: 根岸 和雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09253237/
• 关键词: rpsL遺伝子; Trp-P-2; 太陽光; クロロフィリン; キトサン; 食品; 植物成分; HITECマウス

大腸菌のrpsL遺伝子を含むプラスミドpSSWをクロモソームに組み込んだHITECマウス(9週齢♀)を用いて実験を行った。マウス用固形飼料を粉末とし、水を混ぜ、ペースト状にし、終濃度0.02%Trp-P-2を加えたえさ、0.02%Trp-P-2+3%クロロフィリン-キトサンを加えたえさ、およびこれらを加えなかったものの3種類のえさを調製した。1群3匹づつ、それぞれのえさを8週間経口投与した。このマウスから各臓器を摘出し、DNAを抽出して、変異検出用のサンプルとした。まず、腎臓DNAの分析を行った。大腸菌に導入後、ストレプトマイシン耐性を指標としてrpsL遺伝子の変異体コロニーを選び、変異頻度を測定した。その結果、発がん物質を含まないえさを与えたマウスの脾臓DNAの変異頻度が11.7±4.1x10^<-5>だったのに対し、Trp-P-2のみを与えたマウスでは、19.0±3.6x10^<-15>まで上昇した。Trp-P-2とクロロフィリン-キトサンを同時に投与したマウスでは、変異頻度は、7.1±4.9x10^<-5>まで減少した。太陽光照射は、背中の毛を剃ったHITECマウスを小さめのケージに入れて、一週間行った。毎日、日焼け計の読み、MEDが3になるまで照射した。UVB照射は、300nmに出力のピークを持つトランスイルミネーターを用いて行った。照射したマウスから皮膚をとってDNAを抽出し、フォトプロダクトの生成量を測定した。その結果、マウスによりばらつきはあったが、シクロブタン型ダイマーが検出された。同様に毎日MEDが3になるまで一週間UVB照射を行ったところ、ほぼ同様のシクロブタン型ダイマーの生成が観察された。一方、6,4型のフォトプロダクトは、UVB照射では、少し生成したが、太陽光照射ではほとんど生成していなかった。

The rpsL fungus contains a large number of bacteria, which is called "pSSW". "this is the best way to make sure that you do not know what to do." you can use your HITEC to make sure that you do not. We use solid materials such as powder powder, water mixture, low temperature powder, low temperature 0.02%Trp-P-2, high temperature, 0.02% Trpripp, 2.3% temperature, high temperature, low temperature, high temperature, low temperature, high temperature, high temperature, A group of 3 horses, horses, The equipment is extracted, the DNA is extracted, and the device is used. Please, DNA, analyze the rows. After the introduction of the fungus, the tolerance test refers to the selection and determination of the tolerance of the rpsL bacteria. The results showed that there were significant differences between DNA and lt;-15> in terms of the results of the test, the results of the test, the results of the results, the results, the results At the same time, Trp-P-2

项目成果

Negishi,K.: "The mechanism of mutation induction by a hydrogen bond ambivalent,bicyclic N^4-oxy-2′-deoxycytidine in Escherichia coli" Nucleic Acids Res.,. 25. 1548-1552

Negishi, K.：“大肠杆菌中氢键二价双环 N^4-oxy-2-deoxycytidine 诱导突变的机制”Nucleic Acids Res., 25. 1548-1552

Negishi,K.: "Yeast oligonucleotide transformation : its mechanism and application to analysis of mutaions induced by defined DNA lesions" Nucleic Acids Symposium Series. No.37. 289-290

Negishi,K.：“酵母寡核苷酸转化：其机制及其在分析由确定的 DNA 损伤引起的突变中的应用”核酸研讨会系列。

Hayatsu,H.: "Polynucleotide-chitosan complex,an insoluble but reactive form of polynucleotide" Chem.Pharm.Bull.45. 1363-1368

Hayatsu,H.：“多核苷酸-壳聚糖复合物，一种不溶但具有反应性的多核苷酸形式”Chem.Pharm.Bull.45。

Hayatsu,H.: "Preparation of DNA-chitosan columns and their applications : binding of carcinogens to the column" Nucleic Acids Symposium Series. No.37. 139-140

Hayatsu,H.：“DNA-壳聚糖柱的制备及其应用：致癌物与柱的结合”核酸研讨会系列。