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トランスジェニックマウスを用いた、発がん物質による遺伝子損傷とその抑制の解析

转基因小鼠分析致癌物引起的遗传损伤及其抑制

基本信息

批准号：
08264224
负责人：
根岸和雄
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08264224/
关键词：
クロロフィリン Trp-P-2 HITECマウス rpsL 大腸菌 DNAアダクト突然変異変異スペクトラム

项目摘要

クロロフィリン、またはクロロフィリンを固相担体であるキトサンと結合したクロロフィリン-キトサンをTrp-P-2と混合してHITECマウスに経口投与し、Trp-P-2単独投与のものと比較した。これらを投与したマウスの肝臓からDNAを抽出して、^<32>Pポストラベル法でアダクト量を測定した。また、このDNAを大腸菌に導入して、rpsL遺伝子の変異頻度を測定した。その結果、クロロフィリンまたはクロロフィリン-キトサンの共存により、Trp-P-2によるアダクト形成とrpsL遺伝子の変異の両者ともに減少する傾向が見られた。これはTrp-P-2がクロロフィリンと複合体を形成して、細胞DNAへの到達が阻害されることを示唆している。また、Trp-P-2とクロロフィリンの複合体が試験官内では極めて安定であるにも関わらず、阻害が完全ではないことは、ネズミの消化管内でこの複合体は部分的に解離するものと思われた。一方、マウス細胞中での変異スペクトラムを細菌クロモソーム上での変異と比較する目的で、大腸菌DNA上のrpsL遺伝子を用いた変異検出系の確立を試みた。このシステムは、HITECマウスの結果と比較できる点に加え、我々は従来行ってきた大腸菌クロモソーム中のlacI遺伝子を用いた変異検出系より、塩基配列の長さが半分以下という利点がある。種々のプライマー配列を検討した結果、変異した最近DNAのPCRダイレクトシークエンシングが可能な条件を決定し、モデル系では変異スペクトルを決めることに成功した。

クロロフィリン、またはクロロフィリンを solid phase supportであるキトサンと合したクロロフィリン-キトサンをTrp-P-2 is mixed and HITEC is used for comparison. The amount of DNA extracted using the これらをadministration method is measured using the でアダクトquantity method.また, このDNA is introduced into coliform bacteria, and rpsL の変frequency is determined. Trp-P -2によるアダクト form とrpsL 伝子の変differentの両人ともにReduce the tendency of するが见られた. The Trp-P-2 がクロロフィリンと complex is formed and the cell DNA is blocked when it reaches the target.また、Trp-P-2とクロロフィリンのcomplexがtest験官内では极めて stabilization であるにも关わらず, It blocks the complete dissociation of part of the complex in the digestive tract and the digestive tract. On the one hand, the difference in the difference between the bacteria in the cells of the horse is compared with the difference in the bacteria The purpose of this study was to establish the relationship between the rpsL genes on coliform DNA and to establish the relationship between them.このシステムは、HITECマウスのRESULTSとComparisonできるPointにplusえ、我々は従来行ってきたcoliform bacteria クロIn the モソーム中のlacI缝子を用いた変different検出组より、桩组组的の长さが下半分という利点がある. Kind of 々のプライマーmatching を検した results, 変different した Recent DNA PCR ダイレクトシークエンシングがpossibilityなconditionsをdeterminationし、モデル式では変different スペクトルをdetermination めることにsuccessした.